የፈንገስ ማጥፊያ ተጨማሪ ምግብ በነጠላ ሜሶን ንቦች ውስጥ የተጣራ የኃይል መጨመርን እና የማይክሮባዮምን ልዩነት ይቀንሳል።

Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። የሚጠቀሙበት የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የCSS ድጋፍ አለው። ለተሻለ ውጤት፣ የአሳሽዎን አዲስ ስሪት እንዲጠቀሙ እንመክራለን (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳኋኝነት ሁነታን ያሰናክሉ)። ይህ በእንዲህ እንዳለ፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ጣቢያውን ያለ ቅጥ ወይም ጃቫስክሪፕት እያሳየን ነው።
ፈንገስ መድኃኒቶች ብዙውን ጊዜ በዛፍ ፍሬ አበባ ወቅት ጥቅም ላይ የሚውሉ ሲሆን የነፍሳት የአበባ ዘር ስርጭትን ሊያሰቃዩ ይችላሉ። ሆኖም ግን፣ ንብ ያልሆኑ የአበባ ዘር ስርጭት አስተላላፊዎች (ለምሳሌ፣ ነጠላ ንቦች፣ የኦስሚያ ኮርኒፍሮን) በአበባ ወቅት በፖም ላይ በተለምዶ ጥቅም ላይ ለሚውሉ ንክኪ እና ስልታዊ ፈንገስ መድኃኒቶች እንዴት ምላሽ እንደሚሰጡ ብዙም የሚታወቅ ነገር የለም። ይህ የእውቀት ክፍተት ደህንነቱ የተጠበቀ ክምችት እና የፈንገስ ስርጭት የሚረጭበትን ጊዜ የሚወስኑ የቁጥጥር ውሳኔዎችን ይገድባል። የሁለት ንክኪ ፈንገስ መድኃኒቶች (ካፒታን እና ማንኮዜብ) እና አራት ኢንተርላይየር/ፊቶሲስተም ፈንገስ መድኃኒቶች (ሲፕሮሲክሊን፣ ማይክሎቡታኒል፣ ፒሮስትሮቢን እና ትሪፍሎክሲስትሮቢን) ውጤቶችን ገምግመናል። በእጭ ክብደት መጨመር፣ በሕይወት መትረፍ፣ የጾታ ጥምርታ እና የባክቴሪያ ልዩነት ላይ ያላቸው ተጽእኖ። ግምገማው የተካሄደው ሥር የሰደደ የአፍ ባዮአሳይ በመጠቀም ሲሆን የአበባ ዱቄት በአሁኑ ጊዜ ለመስክ አጠቃቀም በሚመከረው መጠን (1X)፣ ግማሽ መጠን (0.5X) እና ዝቅተኛ መጠን (0.1X) ላይ በመመስረት በሦስት መጠን ታክሟል። ሁሉም የማንኮዜብ እና የፒሪቲሶሊን መጠኖች የሰውነት ክብደትን እና የእጭ ህልውናን በእጅጉ ቀንሰዋል። ከዚያም የማንኮዜብ እጭ ባክቴሪያን ለመለየት የ16S ጂንን ቅደም ተከተል አደረግን፤ ይህም ከፍተኛውን ሞት የሚያስከትል ፈንገስ ነው። በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት በሚመገቡ እጮች ውስጥ የባክቴሪያ ልዩነት እና ብዛት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። የላብራቶሪ ውጤቶቻችን እንደሚያሳዩት በአበባ ወቅት ከእነዚህ ፈንገስ መድኃኒቶች ውስጥ አንዳንዶቹን መርጨት በተለይ ለኦ. ኮርኒፍሮን ጤና ጎጂ ነው። ይህ መረጃ የፍራፍሬ ዛፍ መከላከያ ምርቶችን ዘላቂ አጠቃቀም በተመለከተ ለወደፊቱ የአስተዳደር ውሳኔዎች ጠቃሚ ሲሆን የአበባ ዘር አድራጊዎችን ለመጠበቅ የታለሙ የቁጥጥር ሂደቶች መሰረት ሆኖ ያገለግላል።
ብቸኛ የሆነው የሜሶን ንብ ኦስሚያ ኮርኒፍሮን (Hymenoptera: Megachilidae) በ1970ዎቹ መጨረሻ እና በ1980ዎቹ መጀመሪያ ላይ ከጃፓን ወደ ዩናይትድ ስቴትስ የገባ ሲሆን ዝርያው ከዚያን ጊዜ ጀምሮ በሚተዳደሩ ሥነ-ምህዳሮች ውስጥ አስፈላጊ የአበባ ዘር አሰራጭ ሚና ተጫውቷል። የዚህ ንብ ተፈጥሯዊ ህዝቦች በዩናይትድ ስቴትስ ውስጥ የአልሞንድ እና የፖም እርሻዎችን የሚያራቡ ንቦችን የሚያሟሉ በግምት 50 የዱር ንቦች ዝርያዎች አካል ናቸው። የሜሶን ንቦች ብዙ ተግዳሮቶች ያጋጥሟቸዋል፣ ይህም የመኖሪያ አካባቢ መበታተን፣ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን እና ፀረ-ተባይ መድኃኒቶችን ያጠቃልላል። ከፀረ-ተባይ መድኃኒቶች መካከል፣ ፈንገስ መድኃኒቶች የኃይል መጨመርን፣ መኖን እና የሰውነት ሁኔታን ይቀንሳሉ6,7። ምንም እንኳን የቅርብ ጊዜ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የሜሶን ንቦች ጤና በቀጥታ በኮመንሳል እና ኢኮባቲክ ረቂቅ ተሕዋስያን ተጽዕኖ ስር ነው፣ 8,9 ምክንያቱም ባክቴሪያዎች እና ፈንገሶች በአመጋገብ እና በሽታ የመከላከል ምላሾች ላይ ተጽዕኖ ሊያሳድሩ ስለሚችሉ፣ የፈንገስ መጋለጥ በሜሶን ንቦች ማይክሮባላዊ ልዩነት ላይ ያለው ተጽእኖ ገና ማጥናት ጀምሯል።
የተለያዩ ተፅዕኖዎች (ኮንታክት እና ስልታዊ) ያላቸው ፈንገሶች ከአበባ በፊት እና በአበባ ወቅት በፍራፍሬ እርሻዎች ውስጥ ይረጫሉ፤ እንደ ፖም እከክ፣ መራራ መበስበስ፣ ቡናማ መበስበስ እና የዱቄት ሻጋታ ያሉ በሽታዎችን ለማከም10,11። ፈንገሶች ለአበባ ዘር አስተላላፊዎች ምንም ጉዳት እንደሌላቸው ይቆጠራሉ፣ ስለዚህ በአበባ ወቅት ለአትክልተኞች ይመከራል፤ እነዚህን ፈንገሶች በንቦች መጋለጥ እና መዋጥ በአንጻራዊነት የታወቀ ነው፣ ምክንያቱም በአሜሪካ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ እና በሌሎች በርካታ ብሔራዊ የቁጥጥር ኤጀንሲዎች12,13,14 የፀረ-ተባይ ምዝገባ ሂደት አካል ነው። ሆኖም፣ ፈንገሶች በንቦች ባልሆኑ ላይ የሚያስከትሉት ተጽእኖ ብዙም አይታወቅም ምክንያቱም በዩናይትድ ስቴትስ ውስጥ በግብይት ፈቃድ ስምምነቶች መሠረት አያስፈልግም15። በተጨማሪም፣ ነጠላ ንቦችን ለመፈተሽ በአጠቃላይ ደረጃውን የጠበቁ ፕሮቶኮሎች የሉም16,17፣ እና ንቦችን ለሙከራ የሚያቀርቡ ቅኝ ግዛቶችን ለመጠበቅ አስቸጋሪ ነው18። ፀረ-ተባይ መድኃኒቶች በዱር ንቦች ላይ ያላቸውን ተጽእኖ ለማጥናት በአውሮፓ እና በአሜሪካ የተለያዩ የሚተዳደሩ ንቦች ሙከራዎች እየጨመሩ ነው፣ እና በቅርቡ ለኦ. ኮርኒፍሮን19 ደረጃቸውን የጠበቁ ፕሮቶኮሎች ተዘጋጅተዋል።
ቀንድ ያላቸው ንቦች ሞኖሳይት ሲሆኑ ለማር ንቦች እንደ ተጨማሪ ወይም ምትክ በካርፕ ሰብሎች ውስጥ ለንግድ ጥቅም ላይ ይውላሉ። እነዚህ ንቦች በመጋቢት እና ሚያዝያ መካከል ይወጣሉ፣ ቅድመ-ወለዶቹ ከሴቶቹ በፊት ከሶስት እስከ አራት ቀናት ይፈጠራሉ። ከተጋቡ በኋላ፣ ሴቷ የአበባ ዱቄት እና የአበባ ማር በንቃት ትሰበስባለች እና በቱቦው ጎጆ ጉድጓድ ውስጥ ተከታታይ የጅራት ሴሎችን (ተፈጥሯዊ ወይም አርቲፊሻል)1,20 ለማቅረብ። እንቁላሎቹ በሴሎቹ ውስጥ ባለው የአበባ ዱቄት ላይ ይቀመጣሉ፤ ከዚያም ሴቷ የሚቀጥለውን ሴል ከማዘጋጀትዎ በፊት የሸክላ ግድግዳ ትገነባለች። የመጀመሪያው የጅራት እጭ በቾሪዮን ውስጥ ተዘግቶ የፅንስ ፈሳሾችን ይመገባሉ። ከሁለተኛው እስከ አምስተኛው የጅራት እጭ (ፕሪፑፓ)፣ እጮቹ የአበባ ዱቄትን ይመገባሉ። የአበባ ብናኝ አቅርቦቱ ሙሉ በሙሉ ከሟጠጠ በኋላ፣ እጮቹ ኩቦችን ይፈጥራሉ፣ ይጠመቃሉ እና በተመሳሳይ የጅራት እጭ ክፍል ውስጥ እንደ አዋቂዎች ሆነው ይወጣሉ፣ ብዙውን ጊዜ በበጋ መጨረሻ 20,23። አዋቂዎች በሚቀጥለው የጸደይ ወቅት ይወጣሉ። የአዋቂዎች ህልውና በምግብ ቅበላ ላይ በመመስረት ከተጣራ የኃይል መጨመር (ክብደት መጨመር) ጋር የተያያዘ ነው። ስለዚህ፣ የአበባ ዱቄት የአመጋገብ ጥራት፣ እንዲሁም እንደ የአየር ሁኔታ ወይም ለፀረ-ተባይ መጋለጥ ያሉ ሌሎች ምክንያቶች የመዳን እና የጤና ወሳኞች ናቸው 24.
ከአበባ በፊት የሚተገበሩ ፀረ-ተባዮች እና ፀረ-ፈንገስ መድኃኒቶች በእፅዋት የደም ሥር ውስጥ በተለያዩ ደረጃዎች ሊንቀሳቀሱ ይችላሉ፣ ከትራንስላሚናር (ለምሳሌ፣ እንደ አንዳንድ ፀረ-ፈንገስ መድኃኒቶች ከላይኛው የቅጠል ገጽ ወደ ታችኛው ገጽ መንቀሳቀስ ይችላሉ) 25 እስከ እውነተኛ ስልታዊ ተፅእኖዎች። ከሥሩ ዘውድ ውስጥ ዘልቀው ሊገቡ የሚችሉት፣ የፖም አበባዎችን የአበባ ማር ውስጥ ሊገቡ ይችላሉ26፣ እዚያም የአዋቂዎችን ኦ. ኮርኒፍሮን27 ሊገድሉ ይችላሉ። አንዳንድ ፀረ-ተባዮች ወደ የአበባ ዱቄት ውስጥ ይገባሉ፣ ይህም የበቆሎ እጮችን እድገት ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል እና ሞታቸውን ያስከትላል19። ሌሎች ጥናቶች እንደሚያሳዩት አንዳንድ ፀረ-ፈንገስ መድኃኒቶች ተዛማጅ ዝርያዎችን ጎጆ የመሥራት ባህሪ በእጅጉ ሊለውጡ ይችላሉ። በተጨማሪም፣ ፀረ-ተባይ ተጋላጭነትን ሁኔታ የሚመስሉ የላቦራቶሪ እና የመስክ ጥናቶች ፀረ-ተባይ መድኃኒቶች ፊዚዮሎጂን አሉታዊ ተጽዕኖ እንደሚያሳድሩ አሳይተዋል 22 ሞርፎሎጂ 29 እና ​​የማር ንቦች እና አንዳንድ ነጠላ ንቦች ህልውና። በአበባ ወቅት በቀጥታ ወደ ክፍት አበቦች የሚተገበሩ የተለያዩ የፈንገስ ማጥፊያ ርጭቶች ለአዋቂዎች ለእጭ ልማት የሚሰበሰቡ የአበባ ዱቄትን ሊበክሉ ይችላሉ፣ እነዚህም ውጤቶች ሊጠኑ አልቻሉም30።
የእጭ እድገት በምግብ መፍጫ ሥርዓት የአበባ ዱቄት እና ረቂቅ ተሕዋስያን ማህበረሰቦች ላይ ተጽዕኖ እንደሚያሳድር ከጊዜ ወደ ጊዜ እየታወቀ መጥቷል። የማር ንብ ማይክሮባዮም እንደ የሰውነት ክብደት31፣ የሜታቦሊክ ለውጦች22 እና ለበሽታ አምጪ ተህዋሲያን ተጋላጭነት32 ባሉ መለኪያዎች ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል። ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች የእድገት ደረጃ፣ ንጥረ ነገሮች እና አካባቢ በነጠላ ንቦች ማይክሮባዮም ላይ ያላቸውን ተጽዕኖ መርምረዋል። ​​እነዚህ ጥናቶች በእጭ እና በአበባ ዱቄት ማይክሮባዮሞች33 አወቃቀር እና ብዛት እንዲሁም በጣም የተለመዱ የባክቴሪያ ዝርያዎች Pseudomonas እና Delftia መካከል ተመሳሳይነት አሳይተዋል። ሆኖም፣ ፈንገስ መድሃኒቶች የንብ ጤናን ለመጠበቅ ከስትራቴጂዎች ጋር የተቆራኙ ቢሆኑም፣ በቀጥታ በአፍ በመጋለጥ በእጭ ማይክሮባዮታ ላይ የፈንገስ መድኃኒቶች የሚያስከትሉት ውጤት እስካሁን አልተመረመረም።
ይህ ጥናት በዩናይትድ ስቴትስ ውስጥ በዛፍ ፍሬ ላይ ጥቅም ላይ እንዲውሉ የተመዘገቡ ስድስት በተለምዶ ጥቅም ላይ የሚውሉ የፈንገስ መድኃኒቶችን በእውነተኛ ዓለም የሚወስዱ መጠኖችን ተፈትኗል፣ ይህም ከተበከለ ምግብ በበቆሎ ቀንድ ትል የእሳት እራት እጭ ላይ በአፍ የሚተዳደሩ ንክኪ እና ስልታዊ ፈንገስ መድኃኒቶችን ያካትታል። ንክኪ እና ስልታዊ ፈንገስ መድኃኒቶች የንብ የሰውነት ክብደት መጨመርን እና ሞትን እንደሚቀንሱ ደርሰንበታል፣ ይህም ከማንኮዜብ እና ፒሪቲዮፒድ ጋር ተያይዘው ከሚመጡት በጣም ከባድ ውጤቶች ጋር። ከዚያም በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት አመጋገብ ላይ የሚመገቡትን የማይክሮባላዊ እጭዎች ልዩነት ከቁጥጥር አመጋገብ ጋር አነጻጽረናል። ለሞት መንስኤ ሊሆኑ የሚችሉ ዘዴዎችን እና ለተቀናጀ የተባይ እና የአበባ ዘር ማዳቀል አስተዳደር (IPPM)36 ፕሮግራሞች አንድምታዎችን እንወያያለን።
በኮኮኖች ውስጥ በክረምቱ ወቅት የሚያብቡ የአዋቂዎች ኦ. ኮርኒፍሮን ዝርያዎች ከቢግለርቪል፣ ፒኤ የፍራፍሬ ምርምር ማዕከል የተገኙ ሲሆን ከ −3 እስከ 2°ሴ (±0.3°ሴ) ባለው የሙቀት መጠን ተከማችተዋል። ከሙከራው በፊት (በአጠቃላይ 600 ኩፖኖች)። በግንቦት 2022፣ 100 ኦ. ኮርኒፍሮን ኩፖኖች በየቀኑ ወደ ፕላስቲክ ኩባያዎች ተላልፈዋል (በአንድ ኩባያ 50 ኩፖኖች፣ DI 5 ሴ.ሜ × 15 ሴ.ሜ ርዝመት) እና ጠርሙሶቹ ክፍት እንዲሆኑ እና የሚታኘክ ንጣፍ ለማቅረብ በኩፖዎቹ ውስጥ ይቀመጣሉ፣ ይህም በድንጋይ ንቦች ላይ ያለውን ጫና ይቀንሳል። ኮኮኖችን የያዙ ሁለት የፕላስቲክ ኩባያዎችን በነፍሳት ቤት ውስጥ (30 × 30 × 30 ሴ.ሜ፣ BugDorm MegaView Science Co. Ltd., ታይዋን) ውስጥ ያስቀምጡ እና 50% የሱክሮስ መፍትሄ የያዙ 10 ሚሊ ሊትር መጋቢዎችን ያስቀምጡ እና መዘጋት እና መገጣጠምን ለማረጋገጥ ለአራት ቀናት ያስቀምጡ። 23°ሴ፣ አንጻራዊ እርጥበት 60%፣ ፎቶፔሪዮሪ 10 ሊትር (ዝቅተኛ ጥንካሬ)፡ 14 ቀናት። 100 የተጋቡ ሴቶችና ወንዶች በየጠዋቱ ለስድስት ቀናት (በቀን 100) በሁለት አርቲፊሻል ጎጆዎች ውስጥ ይለቀቁ ነበር (ወጥመድ ጎጆ፡ ስፋት 33.66 × ቁመት 30.48 × ርዝመት 46.99 ሴ.ሜ፤ ተጨማሪ ምስል 1)። በፔንስልቬንያ ስቴት አርቦሬተም፣ በቼሪ አቅራቢያ (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™)፣ ፒች (Prunus persica 'Contender')፣ Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®)፣ ፒር (Pyrus perifolia 'Olympic'፣ Pyrus perifolia 'Shinko'፣ Pyrus perifolia 'Shinseiki')፣ coronaria apple tree (Malus coronaria) እና በርካታ የፖም ዛፎች (Malus coronaria, Malus)፣ የቤት ውስጥ የፖም ዛፍ 'Co-op 30′ Enterprise™፣ Malus apple tree 'Co-Op 31′ Winecrisp™፣ begonia 'Freedom'፣ Begonia 'Golden Delicious'፣ Begonia 'Nova Spy')። እያንዳንዱ ሰማያዊ የፕላስቲክ የወፍ ቤት በሁለት የእንጨት ሳጥኖች ላይ ይገጥማል። እያንዳንዱ የጎጆ ሳጥን 800 ባዶ የክራፍት ወረቀት ቱቦዎችን (ክብ ቅርጽ ያለው ክፍት፣ 0.8 ሴ.ሜ መለያ × 15 ሴ.ሜ ሊትር) (ጆንስቪል ፔፐር ቲዩብ ኩባንያ፣ ሚቺጋን) ወደ ግልጽ ያልሆኑ የሴሎፎን ቱቦዎች (0.7 OD ይመልከቱ የፕላስቲክ መሰኪያዎች (T-1X መሰኪያዎች) የጎጆ ማረፊያ ቦታዎችን ይሰጣሉ።
ሁለቱም የጎጆ ሳጥኖች ወደ ምስራቅ ፊታቸውን አዙረው በአረንጓዴ የፕላስቲክ የአትክልት አጥር (የኤቨርቢልት ሞዴል #889250EB12፣ የመክፈቻ መጠን 5 × 5 ሴ.ሜ፣ 0.95 ሜ × 100 ሜ) ተሸፍነው ነበር፣ ይህም አይጦችን እና ወፎችን እንዳይደርሱ ለመከላከል እና ከጎጆ ሳጥኑ የአፈር ሳጥኖች አጠገብ ባለው የአፈር ወለል ላይ እንዲቀመጡ ተደርጓል። የጎጆ ሳጥን (ተጨማሪ ምስል 1a)። የበቆሎ ቦረየር እንቁላሎች በየቀኑ ከጎጆዎች 30 ቱቦዎችን በመሰብሰብ እና ወደ ላቦራቶሪ በማጓጓዝ ይሰበሰባሉ። መቀስ በመጠቀም፣ በቱቦው ጫፍ ላይ ይቁረጡ፣ ከዚያም የጫጩት ሴሎችን ለማጋለጥ የሽብልቅ ቱቦውን ይበትኑ። የግለሰብ እንቁላሎች እና የአበባ ዱቄታቸው በተጠማዘዘ ስፓቱላ (ማይክሮስላይድ የመሳሪያ ኪት፣ ባዮኪፕ ምርቶች ኢንክ.፣ ካሊፎርኒያ) ተወግደዋል። እንቁላሎቹ በእርጥብ ማጣሪያ ወረቀት ላይ ተቆልፈው ለ2 ሰዓታት በፔትሪ ሳህን ውስጥ ተቀምጠዋል፣ በሙከራዎቻችን ውስጥ ጥቅም ላይ ከመዋላቸው በፊት (ተጨማሪ ምስል 1ለ-መ)።
በላብራቶሪ ውስጥ፣ ከፖም አበባ በፊት እና ወቅት የተተገበሩ ስድስት የፈንገስ መድኃኒቶችን የአፍ ውስጥ መርዛማነት በሦስት ክምችቶች (0.1X፣ 0.5X እና 1X) ገምግመናል፣ 1X በ100 ጋሎን ውሃ/ኤከር የተተገበረው ምልክት ነው። ከፍተኛ የመስክ መጠን = በእርሻ ውስጥ ያለው ክምችት)። ሠንጠረዥ 1)። እያንዳንዱ ክምችት 16 ጊዜ ተደግሟል (n = 16)። ሁለት ንክኪ ፈንገስ መድኃኒቶች (ሠንጠረዥ S1፡ mancozeb 2696.14 ppm እና captan 2875.88 ppm) እና አራት ስልታዊ ፈንገስ መድኃኒቶች (ሠንጠረዥ S1፡ pyrithiostrobin 250.14 ppm፤ trifloxystrobin 110.06 ppm፤ myclobutanil azole 75 .12 ppm፤ cyprodinil 280.845 ppm) በፍራፍሬዎች፣ በአትክልቶች እና በጌጣጌጥ ሰብሎች ላይ ያለውን መርዛማነት። የአበባ ዱቄቱን በፈጪ በመጠቀም ቀላቅለን፣ 0.20 ግራም ወደ ጉድጓድ (24-well Falcon Plate) አዛወርን፣ እና 1 μL የፈንገስ መከላከያ መፍትሄ ጨምረን እንቁላሎቹ የተቀመጡባቸውን 1 ሚሜ ጥልቅ ጉድጓዶች በመጠቀም ፒራሚዳል የአበባ ዱቄት ፈጠርን። በትንሽ ስፓቱላ (ተጨማሪ ምስል 1c,d) ያስቀምጡ። የፋልኮን ሳህኖች በክፍል ሙቀት (25°ሴ) እና 70% አንጻራዊ እርጥበት ተከማችተዋል። በንጹህ ውሃ የታከመ ተመሳሳይ የአበባ ዱቄት አመጋገብ ከተመገቡት የቁጥጥር እጭዎች ጋር አነጻጽረናቸው። የሞት መጠንን መዝግበን እጭዎቹ የቅድመ ዝግጅት ዕድሜ እስኪደርሱ ድረስ በየሁለት ቀኑ እንለካለን (ፊሸር ሳይንቲፊክ፣ ትክክለኛነት = 0.0001 ግ)። በመጨረሻም፣ የፆታ ጥምርታ ከ2.5 ወራት በኋላ ኮኩኑን በመክፈት ተገምግሟል።
ዲኤንኤ የተወሰደው ከሙሉ የኦ. ኮርኒፍሮን እጭ (n = 3 በሕክምና ሁኔታ፣ በማንኮዜብ የታከመ እና ያልታከመ የአበባ ዱቄት) ሲሆን በእነዚህ ናሙናዎች ላይ የማይክሮባላዊ ልዩነት ትንተናዎችን አድርገናል፣ በተለይም በማንኮዜብ ውስጥ በእጭ ውስጥ ከፍተኛው ሞት ታይቷል። MnZnን የሚቀበል። ዲኤንኤ ተባብሷል፣ በDNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA kit (Zymo Research፣ Irvine፣ CA) እና በv3 ኪት በኢሉሚና® MiSeq™ ላይ ቅደም ተከተል (600 ዑደቶች) ተደርጓል። የባክቴሪያ 16S ራይቦሶማል አር ኤን ኤ ጂኖች የታለመ ቅደም ተከተል በQuick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research፣ Irvine፣ CA) በመጠቀም የ16S rRNA ጂን V3-V4 ክልልን ዒላማ በማድረግ ፕሪመሮችን በመጠቀም ተካሂዷል። በተጨማሪም፣ የ18S ቅደም ተከተል 10% PhiX ማካተትን በመጠቀም ተካሂዷል፣ እና ማጉላት ፕራይመር ጥንድ 18S001 እና NS4ን በመጠቀም ተካሂዷል።
የተጣመሩ reads39ን በQIIME2 ቧንቧ መስመር (v2022.11.1) በመጠቀም ያስመጡ እና ያስኬዱ። እነዚህ ንባቦች ተቆርጠው ተዋህደዋል፣ እና የቺሜሪክ ቅደም ተከተሎች በQIIME2 ውስጥ ባለው የDADA2 ተሰኪ (qiime dada2 noise pairing)40 በመጠቀም ተወግደዋል። የ16S እና 18S ክፍል ምደባዎች የተከናወኑት የobject classifier plugin Classify-sklearn እና አስቀድሞ በሰለጠነው silva-138-99-nb-classifier በመጠቀም ነው።
ሁሉም የሙከራ መረጃዎች መደበኛነት (ሻፒሮ-ዊልክስ) እና የልዩነቶች ተመሳሳይነት (የሌቨን ሙከራ) ተፈትሸዋል። የውሂብ ስብስቡ የፓራሜትሪክ ትንተና ግምቶችን ስላላሟላ እና ለውጡ የቀሩትን መደበኛ ለማድረግ ባለመቻሉ፣ ህክምናው በእጭ ትኩስ ክብደት ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመገምገም ሁለት ምክንያቶች [ጊዜ (የሶስት-ደረጃ 2፣ 5፣ እና 8 ቀን የጊዜ ነጥቦች) እና ፈንገስ ማጥፊያ] ያለው ፓራሜትሪክ ያልሆነ ባለሁለት መንገድ ANOVA (ክሩስካል-ዋሊስ) አድርገናል፣ ከዚያም የድህረ ሆክ ፓራሜትሪክ ያልሆነ ጥንድ ንጽጽሮች በዊልኮክሰን ሙከራ ተካሂደዋል። ፈንገስ ማጥፊያዎች በሦስት የፈንገስ መድኃኒቶች ክምችት ላይ በሕይወት መትረፍ ላይ ያላቸውን ተጽእኖ ለማነፃፀር ከፖይሰን ስርጭት ጋር አጠቃላይ መስመራዊ ሞዴል (GLM) ተጠቅመናል። ለልዩነት ብዛት ትንተና፣ የአምፒኮን ቅደም ተከተል ልዩነቶች (ASVs) ብዛት በጂነስ ደረጃ ተደምሯል። 16S (የጂነስ ደረጃ) እና 18S አንጻራዊ ብዛትን በሚጠቀሙ ቡድኖች መካከል ያለውን የልዩነት ብዛት ንጽጽር ለማነፃፀር የቦታ፣ የስኬል እና የቅርጽ (GAMLSS) አጠቃላይ ተጨማሪ ሞዴል በመጠቀም ከቤታ ዜሮ-ኢንፍላይትድ (BEZI) የቤተሰብ ስርጭቶች ጋር ተካሂዷል፣ እነዚህም በማይክሮባዮም R43 (v1.1) ውስጥ በማክሮ ላይ ተመስለዋል። 1)። ከልዩነት ትንተና በፊት የማይቶኮንድሪያል እና ክሎሮፕላስት ዝርያዎችን ያስወግዱ። በ18S የተለያዩ የታክሶኖሚክ ደረጃዎች ምክንያት፣ የእያንዳንዱ ታክሶን ዝቅተኛው ደረጃ ብቻ ለልዩነት ትንተናዎች ጥቅም ላይ ውሏል። ሁሉም የስታቲስቲክስ ትንታኔዎች የተከናወኑት R (v. 3.4.3.፣ CRAN ፕሮጀክት) በመጠቀም ነው (ቡድን 2013)።
ለማንኮዜብ፣ ለፒሪቲዮስትሮቢን እና ለትሪፍሎክሲስትሮቢን መጋለጥ በ O. ኮርኒፍሮን ውስጥ የሰውነት ክብደት መጨመርን በእጅጉ ቀንሷል (ምስል 1)። እነዚህ ውጤቶች በተገመገሙት ሦስቱም መጠኖች በተከታታይ ታይተዋል (ምስል 1a–c)። ሳይክሎስትሮቢን እና ማይክሎቡታኒል የእጮችን ክብደት በእጅጉ አልቀነሱም።
በአራት የአመጋገብ ሕክምናዎች (ሆሞጀኔይም የአበባ ዱቄት መኖ + ፈንገስ ማጥፊያ፡ ቁጥጥር፣ 0.1X፣ 0.5X እና 1X መጠኖች) በሦስት የጊዜ ነጥቦች የሚለካው የስቴም ቦረር እጮች አማካይ ትኩስ ክብደት። (ሀ) ዝቅተኛ መጠን (0.1X)፡ የመጀመሪያ ጊዜ ነጥብ (ቀን 1)፡ χ2፡ 30.99፣ DF = 6፤ P < 0.0001፣ ሁለተኛ ጊዜ ነጥብ (ቀን 5)፡ 22.83፣ DF = 0.0009፤ ለሶስተኛ ጊዜ፤ ነጥብ (ቀን 8)፡ χ2፡ 28.39፣ DF = 6፤ (ለ) ግማሽ መጠን (0.5X)፡ የመጀመሪያ ጊዜ ነጥብ (ቀን 1)፡ χ2፡ 35.67፣ DF = 6፤ P < 0.0001፣ ሁለተኛ ጊዜ ነጥብ (ቀን አንድ)፡ χ2፡ 15.98፣ DF = 6፤ P = 0.0090፤ የሶስተኛ ጊዜ ነጥብ (ቀን 8) χ2: 16.47፣ DF = 6፤ (ሐ) ቦታ ወይም ሙሉ መጠን (1X): የመጀመሪያ ጊዜ ነጥብ (ቀን 1) χ2: 20.64፣ P = 6፤ P = 0.0326፣ ሁለተኛ ጊዜ ነጥብ (ቀን 5): χ2: 22.83፣ DF = 6፤ P = 0.0009፤ የሶስተኛ ጊዜ ነጥብ (ቀን 8): χ2: 28.39፣ DF = 6፤ የልዩነት ፓራሜትሪክ ያልሆነ ትንተና። አሞሌዎች የጥንድ ንጽጽር አማካኝ ± SE ይወክላሉ (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05፣ **P ≤ 0.001፣ ***P ≤ 0.0001።
በዝቅተኛው መጠን (0.1X)፣ የእጭ የሰውነት ክብደት በትሪፍሎክሲስትሮቢን፣ በማንኮዜብ 49%፣ በማይክሎቡታኒል 48% እና በፒሪቲስትሮቢን 46% ቀንሷል (ምስል 1ሀ)። በግማሽ የመስክ መጠን (0.5X) ሲጋለጥ፣ የማንኮዜብ እጮች የሰውነት ክብደት በ86%፣ ፒሪቲዮስትሮቢን በ52% እና ትሪፍሎክሲስትሮቢን በ50% ቀንሷል (ምስል 1ለ)። ሙሉ የመስክ መጠን (1X) የማንኮዜብ የእጭ ክብደት በ82%፣ ፒሪቲዮስትሮቢን በ70% እና ትሪፍሎክሲስትሮቢን፣ ማይክሎቡታኒል እና ሳንጋርድ በግምት 30% ቀንሷል (ምስል 1ሐ)።
በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት መካከል የሟችነት መጠን ከፍተኛ ሲሆን በመቀጠልም ፒሪቲዮስትሮቢን እና ትራይፍሎክሲስትሮቢን ይከተላሉ። የማንኮዜብ እና የፒሪቲሶሊን መጠን እየጨመረ በሄደ ቁጥር የሟችነት መጠኑ ጨምሯል (ምስል 2፤ ሠንጠረዥ 2)። ሆኖም፣ የትሪፍሎክሲስትሮቢን ክምችት እየጨመረ በሄደ ቁጥር የበቆሎ ቦረሮች ሞት በትንሹ ብቻ ጨምሯል፤ ሳይፕሮዲኒል እና ካፒታን ከቁጥጥር ሕክምናዎች ጋር ሲነጻጸር የሟችነትን መጠን በከፍተኛ ሁኔታ አላሳደጉም።
የቦረር ዝንብ እጭዎች ሞት በስድስት የተለያዩ ፀረ-ፈንገስ መድኃኒቶች ለየብቻ ከተያዙ የአበባ ዱቄት ከተመገቡ በኋላ ተነጻጽሯል። ማንኮዜብ እና ፔንቶፒራሚድ ለበቆሎ ትሎች በአፍ ለመጋለጥ የበለጠ ስሜታዊ ነበሩ (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (መስመር፣ ተዳፋት = 0.29, P < 0.001; ተዳፋት = 0.24, P <0.00))።
በአማካይ በሁሉም የሕክምና ዓይነቶች 39.05% የሚሆኑ ታካሚዎች ሴቶች ሲሆኑ 60.95% የሚሆኑት ደግሞ ወንዶች ነበሩ። ከቁጥጥር ሕክምናዎቹ መካከል፣ በዝቅተኛ መጠን (0.1X) እና በግማሽ መጠን (0.5X) ጥናቶች ውስጥ የሴቶች ድርሻ 40% ሲሆን በመስክ መጠን (1X) ጥናቶች ደግሞ 30% ነበር። በማንኮዜብ እና ማይክሎቡታኒል በሚታከሙ የአበባ ዱቄት በሚመገቡ እጭዎች መካከል በ0.1X መጠን፣ 33.33% የሚሆኑት አዋቂዎች ሴቶች፣ 22% የሚሆኑት አዋቂዎች ሴቶች፣ 44% የሚሆኑት የአዋቂዎች እጭ ሴቶች፣ 44% የሚሆኑት የአዋቂዎች እጭ ሴቶች ናቸው። ሴት፣ 41% የሚሆኑት የአዋቂዎች እጭ ሴቶች እና ቁጥጥር 31% ነበሩ (ምስል 3ሀ)። በመጠን 0.5 እጥፍ፣ በማንኮዜብ እና በፒሪቲዮስትሮቢን ቡድን ውስጥ 33% የሚሆኑት የአዋቂዎች ትሎች ሴት፣ በትሪፍሎክሲስትሮቢን ቡድን ውስጥ 36%፣ በማይክሎቡታኒል ቡድን ውስጥ 41% እና በሳይፕሮስትሮቢን ቡድን ውስጥ 46% ነበሩ። ይህ አሃዝ በካፒታን ቡድን ውስጥ 53% እና በቁጥጥር ቡድኑ ውስጥ 38% ነበር (ምስል 3ለ)። በ1 እጥፍ መጠን፣ የማንኮዜብ ቡድን 30% ሴቶች፣ 36% የፒሪቲዮስትሮቢን ቡድን፣ 44% የትሪፍሎክሲስትሮቢን ቡድን፣ 38% የማይክሎቡታኒል ቡድን፣ 50% የቁጥጥር ቡድኑ ሴቶች ነበሩ - 38.5% (ምስል 3ሐ)።
የእጭ ደረጃ ፈንገስ ከተጋለጡ በኋላ የሴት እና የወንድ ቦረቦሮች መቶኛ። (ሀ) ዝቅተኛ መጠን (0.1X)። (ለ) ግማሽ መጠን (0.5X)። (ሐ) የመስክ መጠን ወይም ሙሉ መጠን (1X)።
የ16S ቅደም ተከተል ትንተና እንደሚያሳየው የባክቴሪያው ቡድን በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት እና ባልታከመ የአበባ ዱቄት የተመገቡ እጮች መካከል ልዩነት አሳይቷል (ምስል 4a)። በአበባ ዱቄት ላይ የተመገቡት ያልታከሙ እጭዎች የማይክሮባላዊ መረጃ ጠቋሚ በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት ከተመገቡት እጭዎች ከፍ ያለ ነው (ምስል 4ለ)። በቡድኖች መካከል የሚታየው የብዝሃነት ልዩነት በስታቲስቲክስ ደረጃ ጉልህ ባይሆንም፣ እጭዎች ባልታከመ የአበባ ዱቄት ከተመገቡት በእጅጉ ያነሰ ነበር (ምስል 4ሐ)። አንጻራዊ ብዛት በመቆጣጠሪያ የአበባ ዱቄት የተመገቡት እጭዎች በማይኮዜብ የታከመ እጭ ከሚመገቡት እጭዎች የበለጠ የተለያየ መሆኑን ያሳያል (ምስል 5a)። ገላጭ ትንተና በቁጥጥር እና በማንኮዜብ የታከመ ናሙናዎች ውስጥ 28 ዝርያዎች መኖራቸውን አሳይቷል (ምስል 5ለ)። ሐ በ18S ቅደም ተከተል በመጠቀም የሚደረግ ትንተና ምንም ጉልህ ልዩነቶች አላሳየም (ተጨማሪ ምስል 2)።
በ16S ቅደም ተከተሎች ላይ የተመሰረቱ የSAV መገለጫዎች ከሻነን ብልጽግና ጋር ተነጻጽረው በፋይለም ደረጃ ላይ የታዩ ብልጽግናዎችን አሳይተዋል። (ሀ) ባልተመረመረ የአበባ ዱቄት ወይም ቁጥጥር (ሰማያዊ) እና በማንኮዜብ በሚመገቡ እጭዎች (ብርቱካናማ) ውስጥ ባለው አጠቃላይ የማይክሮባላዊ ማህበረሰብ መዋቅር ላይ የተመሠረተ ዋና የኮንትሮል ትንተና (PCoA)። እያንዳንዱ የውሂብ ነጥብ የተለየ ናሙና ይወክላል። PCoA የተሰላው ባለብዙ ተለዋዋጭ ቲ ​​ስርጭት ብሬይ-ከርቲስ ርቀትን በመጠቀም ነው። ኦቫልስ የ80% በራስ መተማመን ደረጃን ይወክላሉ። (ለ) ቦክስፕሎት፣ ጥሬ የሻነን ሀብት መረጃ (ነጥቦች) እና ሐ. የሚታይ ሀብት። የቦክስፕሎቶች ለመካከለኛ መስመር፣ ኢንተርኳርትል ክልል (IQR) እና 1.5 × IQR (n = 3) ሳጥኖችን ያሳያሉ።
በማንኮዜብ የታከመ እና ያልታከመ የአበባ ዱቄት ላይ የሚመገቡ የእጭ ረቂቅ ተሕዋስያን ማህበረሰቦች ስብጥር። (ሀ) በእጭ ውስጥ አንጻራዊ የሆነ የማይክሮባላዊ ዝርያ ንባብ። (ለ) የተለዩ የማይክሮባላዊ ማህበረሰቦች የሙቀት ካርታ። ዴልፊያ (የዕድል ጥምርታ (OR) = 0.67፣ P = 0.0030) እና ፕሴውዶሞናስ (OR = 0.3፣ P = 0.0074)፣ ማይክሮባክቴሪየም (OR = 0.75፣ P = 0.0617) (OR = 1.5፣ P = 0.0060)፤ የሙቀት ካርታ ረድፎች የተቆራኙት በተዛማጅ ርቀት እና በአማካይ ግንኙነት ነው።
ውጤቶቻችን እንደሚያሳዩት በአፍ የሚወሰዱ ለግንኙነት (ማንኮዜብ) እና ለስርዓታዊ (ፒሮስትሮቢን እና ትሪፍሎክሲስትሮቢን) ፈንገስ መድኃኒቶች፣ በአበባ ወቅት በስፋት ጥቅም ላይ የሚውሉት፣ የክብደት መጨመርን በእጅጉ ቀንሰዋል እና የበቆሎ እጮች ሞትን ጨምሯል። በተጨማሪም፣ ማንኮዜብ በቅድመ ዝግጅት ደረጃ ላይ የማይክሮባዮምን ልዩነት እና ብልጽግና በእጅጉ ቀንሷል። ማይክሎቡታኒል፣ ሌላው ሥርዓታዊ ፈንገስ መድኃኒት፣ በሦስቱም መጠኖች የእጭ የሰውነት ክብደት መጨመርን በእጅጉ ቀንሷል። ይህ ውጤት በሁለተኛው (ቀን 5) እና በሦስተኛው (ቀን 8) የጊዜ ነጥቦች ላይ ታይቷል። በአንጻሩ፣ ሳይፕሮዲኒል እና ካፒታን ከቁጥጥር ቡድኑ ጋር ሲነጻጸር የክብደት መጨመርን ወይም የመዳን እድልን በእጅጉ አልቀነሱም። እስከምናውቀው ድረስ፣ ይህ ሥራ የበቆሎ ሰብሎችን በቀጥታ የአበባ ዱቄት በመጋለጥ ለመከላከል የሚያገለግሉ የተለያዩ ፈንገስ መድኃኒቶች የመስክ መጠን ውጤቶችን የሚወስን የመጀመሪያው ነው።
ሁሉም የፈንገስ መድኃኒቶች ከቁጥጥር ሕክምናዎች ጋር ሲነፃፀሩ የሰውነት ክብደት መጨመርን በእጅጉ ቀንሰዋል። ማንኮዜብ በእጭ የሰውነት ክብደት መጨመር ላይ ከፍተኛውን ተጽዕኖ ያሳደረ ሲሆን በአማካይ 51% ቅናሽ አሳይቷል፣ ከዚያም ፒሪቲዮስትሮቢን ይከተላል። ሆኖም ግን፣ ሌሎች ጥናቶች በእጭ ደረጃዎች ላይ የፈንገስ መድኃኒቶች የመስክ መጠን አሉታዊ ተፅእኖዎችን ሪፖርት አላደረጉም። ምንም እንኳን ዲቲዮካርባሜት ባዮሳይዶች ዝቅተኛ አጣዳፊ መርዛማነት እንዳላቸው ቢታዩም45፣ እንደ ማንኮዜብ ያሉ ኤቲሊን ቢሲዲቲዮካርባማትስ (EBDCS) ወደ ዩሪያ ኤቲሊን ሰልፋይድ ሊፈርስ ይችላል። በሌሎች እንስሳት ላይ በሚውቴጂክ ተፅእኖዎች ምክንያት፣ ይህ የመበስበስ ምርት ለተስተዋሉት ውጤቶች ተጠያቂ ሊሆን ይችላል46,47። ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የኢቲሊን ቲዩሬአ ምስረታ እንደ ከፍተኛ የሙቀት መጠን48፣ የእርጥበት መጠን49 እና የምርት ማከማቻ ርዝመት50 ባሉ ምክንያቶች ተጽዕኖ ያሳድራል። ለባዮሳይዶች ትክክለኛ የማከማቻ ሁኔታዎች እነዚህን የጎንዮሽ ጉዳቶች ሊቀንሱ ይችላሉ። በተጨማሪም የአውሮፓ የምግብ ደህንነት ባለስልጣን በሌሎች እንስሳት የምግብ መፈጨት ስርዓቶች ላይ ካርሲኖጂኒክ እንደሆነ ታይቷል51 የፒሪቲዮፓይድ መርዛማነት ስጋት እንዳለው ገልጿል51።
የማንኮዜብ፣ የፒሪቲዮስትሮቢን እና የትሪፍሎክሲስትሮቢን በአፍ ውስጥ መውሰድ የበቆሎ ቦረሮች እጭዎች ሞትን ይጨምራል። በተቃራኒው፣ ማይክሎቡታኒል፣ ሲፕሮሳይክሊን እና ካፒታን በሞት ላይ ምንም ተጽእኖ አላሳደሩም። እነዚህ ውጤቶች ከላዱርነር እና ሌሎች 52 የተለዩ ናቸው፣ እነሱም ካፒታን የአዋቂዎችን ኦ. ሊግናሪያ እና አፒስ ሜልፊራ ኤል (Hymenoptera, Apisidae) ህልውና በእጅጉ እንደቀነሰ አሳይተዋል። በተጨማሪም፣ እንደ ካፒታን እና ቦስካሊድ ያሉ ፈንገስ መድኃኒቶች የእጭ ሞትን እንደሚያስከትሉ ወይም የአመጋገብ ባህሪን እንደሚቀይሩ ተገኝተዋል52,53,54 ወይም የአመጋገብ ባህሪን እንደሚቀይሩ55። እነዚህ ለውጦች በተራው የአበባ ዱቄት የአመጋገብ ጥራት እና በመጨረሻም የእጭ ደረጃ የኃይል መጨመርን ሊነኩ ይችላሉ። በቁጥጥር ቡድኑ ውስጥ የታየው ሞት ከሌሎች ጥናቶች 56,57 ጋር የሚጣጣም ነበር።
በስራችን ውስጥ የታየው የወንድነት-ተወዳጅ የወሲብ ጥምርታ እንደ በቂ ያልሆነ የወንድነት እና በአበባ ወቅት መጥፎ የአየር ሁኔታ ባሉ ምክንያቶች ሊብራራ ይችላል፣ ቀደም ሲል በቪሲንስ እና ቦሽ ለኦ. ኮርኑታ እንደተጠቆመው። በጥናታችን ውስጥ ያሉ ሴቶች እና ወንዶች ለመጋባት አራት ቀናት ቢኖራቸውም (ይህ በአጠቃላይ ለስኬት ማጋባት በቂ እንደሆነ የሚታሰበው ጊዜ)፣ ጭንቀትን ለመቀነስ ሆን ብለን የብርሃን ጥንካሬን ቀንሰናል። ሆኖም፣ ይህ ማሻሻያ ሳያውቁት በማጋባት ሂደት ውስጥ ጣልቃ ሊገባ ይችላል61። በተጨማሪም፣ ንቦች ዝናብን እና ዝቅተኛ የሙቀት መጠንን (<5°C) ጨምሮ ለብዙ ቀናት መጥፎ የአየር ሁኔታ ያጋጥማቸዋል፣ ይህም ደግሞ በማጋባት ስኬት ላይ አሉታዊ ተጽዕኖ ሊያሳድር ይችላል4,23።
ጥናታችን በጠቅላላው የእጭ ማይክሮባዮም ላይ ያተኮረ ቢሆንም፣ ውጤቶቻችን ለንብ አመጋገብ እና ለፈንገስ መጋለጥ ወሳኝ ሊሆኑ በሚችሉ የባክቴሪያ ማህበረሰቦች መካከል ሊኖር ስለሚችለው ግንኙነት ግንዛቤ ይሰጣሉ። ለምሳሌ፣ በማንኮዜብ የታከመ የአበባ ዱቄት የሚመገቡት እጭዎች ያልተከተፈ የአበባ ዱቄት ከሚመገቡት እጭዎች ጋር ሲነጻጸር የማይክሮባላዊ ማህበረሰብ መዋቅር እና ብዛት በእጅጉ ቀንሰዋል። ያልታከመ የአበባ ዱቄት በሚመገቡ እጭዎች፣ ፕሮቲዮባክቴሪያ እና አክቲኖባክቴሪያ በብዛት የሚገኙባቸው እና በአብዛኛው ኤሮቢክ ወይም ፋኩልቲካል ኤሮቢክ ነበሩ። ዴልፍት ባክቴሪያዎች፣ ብዙውን ጊዜ ከነጠላ ንብ ዝርያዎች ጋር የተያያዙት፣ አንቲባዮቲክ እንቅስቃሴ እንዳላቸው ይታወቃል፣ ይህም በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን የመከላከል ሚና እንዳለው ያሳያል። ሌላው የባክቴሪያ ዝርያ፣ ፕሴዩዶሞናስ፣ ባልተከተፈ የአበባ ዱቄት በሚመገቡ እጭዎች ውስጥ በብዛት የሚገኝ ነበር፣ ነገር ግን በማንኮዜብ የታከመ እጭ ውስጥ በእጅጉ ቀንሷል። ውጤቶቻችን ቀደም ሲል Pseudomonasን በኦ. bicornis35 እና በሌሎች ነጠላ ተርቦች34 ውስጥ ካሉት በጣም በብዛት ከሚገኙት ዝርያዎች አንዱ እንደሆነ የሚለዩ ጥናቶችን ይደግፋሉ። ምንም እንኳን የፕሴዩዶሞናስ በ O. ኮርኒፍሮን ጤና ላይ ስላለው ሚና የሙከራ ማስረጃ ባይጠናም፣ ይህ ባክቴሪያ በቢንጥላ ፓዴረስ ፉሲፔስ ውስጥ የመከላከያ መርዛማ ንጥረ ነገሮችን ውህደት እንደሚያበረታታ እና በብልቃጥ ውስጥ የአርጊኒን ሜታቦሊዝምን እንደሚያበረታታ ታይቷል 35፣ 65። እነዚህ ምልከታዎች በ O. ኮርኒፍሮን እጭዎች እድገት ወቅት በቫይረስ እና በባክቴሪያ መከላከያ ውስጥ ሊኖር የሚችል ሚና እንደሚኖራቸው ይጠቁማሉ። ማይክሮባክቴሪየም በጥናታችን ውስጥ የተገኘ ሌላ ዝርያ ሲሆን በረሃብ ሁኔታዎች ውስጥ በጥቁር ወታደር ዝንብ እጭዎች ውስጥ በከፍተኛ ቁጥር እንደሚገኝ የተዘገበ ነው66። በ O. ኮርኒፍሮን እጭዎች ውስጥ፣ ማይክሮባክቴሪያዎች በውጥረት ሁኔታዎች ውስጥ የአንጀት ማይክሮባዮምን ሚዛን እና የመቋቋም ችሎታ ላይ አስተዋጽኦ ሊያደርጉ ይችላሉ። በተጨማሪም፣ ሮዶኮከስ በ O. ኮርኒፍሮን እጭዎች ውስጥ የሚገኝ ሲሆን በማጽዳት ችሎታው ይታወቃል67። ይህ ዝርያ በ A. ፍሎሪያ አንጀት ውስጥም ይገኛል፣ ነገር ግን በጣም ዝቅተኛ በሆነ መጠን68። ውጤቶቻችን በእጭዎች ውስጥ የሜታቦሊክ ሂደቶችን ሊቀይሩ የሚችሉ በርካታ ማይክሮባላዊ ታክሳዎች ላይ በርካታ የጄኔቲክ ልዩነቶች መኖራቸውን ያሳያሉ። ሆኖም፣ የ O. ኮርኒፍሮን ተግባራዊ ልዩነት የተሻለ ግንዛቤ ያስፈልጋል።
ባጭሩ፣ ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት ማንኮዜብ፣ ፒሪቲዮስትሮቢን እና ትሪፍሎክሲስትሮቢን የሰውነት ክብደት መጨመርን እና የበቆሎ ቦረሮች እጭዎች ሞትን ቀንሰዋል። ምንም እንኳን ፈንገስ አዘል መድኃኒቶች በአበባ ዘር አወጣጥ ላይ ስለሚያስከትሉት ተጽእኖ ስጋት እየጨመረ ቢሆንም፣ የእነዚህ ውህዶች ቀሪ ሜታቦላይቶች ተጽእኖን በተሻለ ሁኔታ መረዳት ያስፈልጋል። እነዚህ ውጤቶች ገበሬዎች የፍራፍሬ ዛፍ አበባ ከመብቀላቸው በፊት እና ወቅት የተወሰኑ ፈንገስ አዘል መድኃኒቶችን ከመጠቀም እንዲቆጠቡ በሚያግዙ የተቀናጁ የአበባ ዘር አወጣጥ አስተዳደር ፕሮግራሞች ምክሮች ውስጥ ሊካተቱ ይችላሉ፣ ይህም ፈንገስ አወጣጦችን በመምረጥ እና የአተገባበሩን ጊዜ በመቀየር ወይም ብዙም ጎጂ ያልሆኑ አማራጮችን መጠቀምን በማበረታታት ነው። 36. ይህ መረጃ እንደ ነባር የሚረጩ ፕሮግራሞችን ማስተካከል እና ፈንገስ አወጣጦችን በሚመርጡበት ጊዜ የሚረጭ ጊዜን መቀየር ወይም ብዙም አደገኛ ያልሆኑ አማራጮችን መጠቀምን በማስፋፋት ያሉ ምክሮችን ለማዘጋጀት አስፈላጊ ነው። ፈንገስ አወጣጦች በጾታ ጥምርታ፣ በአመጋገብ ባህሪ፣ በአንጀት ማይክሮባዮም እና በቆሎ ቦረሮች ክብደት መቀነስ እና ሞት ላይ ስለሚያሳድሩ ሞለኪውላዊ ዘዴዎች አሉታዊ ተፅእኖዎች ተጨማሪ ምርምር ያስፈልጋል።
በስእል 1 እና 2 ውስጥ ያሉት የምንጭ መረጃዎች 1፣ 2 እና 3 በ figshare የውሂብ ማከማቻ DOI ውስጥ ተቀምጠዋል፡ https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 እና https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233። በአሁኑ ጥናት ውስጥ የተተነተኑት ቅደም ተከተሎች (ምስል 4፣ 5) በ NCBI SRA ማከማቻ ቁጥር PRJNA1023565 ስር ይገኛሉ።
ቦሽ፣ ጄ. እና ኬምፕ፣ WP የማር ንብ ዝርያዎችን እንደ የአበባ ዘር አራማጆች ማዘጋጀት እና ማቋቋም፡ የኦስሚያ ዝርያ ምሳሌ። (Hymenoptera: Megachilidae) እና የፍራፍሬ ዛፎች። bull. Ntomore. resource. 92, 3–16 (2002).
ፓርከር፣ ኤምጂ እና ሌሎችም። በኒውዮርክ እና ፔንስልቬንያ በሚገኙ የፖም አምራቾች መካከል የአበባ ዘር የማሰራጨት ልምዶች እና የአማራጭ የአበባ ዘር አራማጆች ግንዛቤ። ዝመና። ግብርና። የምግብ ስርዓቶች። 35፣ 1–14 (2020)።
ኮች አይ.፣ ሎንስዶርፍ ኢ.ደብሊው.፣ አርትዝ ዲአር፣ ፒትስ-ሲንግ ቲኤል እና ሪኬትስ ቲ.ኤች. የለውዝ የአበባ ዘር ስርጭት ሥነ-ምህዳር እና ኢኮኖሚክስ በአገሬው ተወላጅ ንቦች በመጠቀም። ጄ. ኢኮኖሚክስ። ንቶሞር። 111፣ 16–25 (2018)።
ሊ፣ ኢ.፣ ሄ፣ ዋይ.፣ እና ፓርክ፣ ዋይ.-ኤል. የአየር ንብረት ለውጥ በትራጎፓን ፊኖሎጂ ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ፡ ለሕዝብ አስተዳደር አንድምታ። ክሊብ። ለውጥ 150፣ 305–317 (2018)።
አርትዝ፣ ዲአር እና ፒትስ-ሲንግ፣ ቲኤል የፈንገስ መድሀኒት እና ረዳት መርጫዎች በሁለት የሚተዳደሩ ነጠላ ንቦች (ኦስሚያ ሊግናሪያ እና ሜጋቺሌ ሮቱንዳታ) ጎጆ የመሥራት ባህሪ ላይ የሚያሳድሩት ተጽዕኖ። ፕሎኤስ ዋን 10፣ e0135688 (2015)።
ቤውቫይስ፣ ኤስ. እና ሌሎችም። ዝቅተኛ መርዛማ የሆነ የሰብል ፈንገስ (ፌንቡኮናዞል) በወንዶች የመራቢያ ጥራት ምልክቶች ላይ ጣልቃ በመግባት በዱር ብቸኛ ንቦች ላይ የመተሳሰር ስኬት እንዲቀንስ ያደርጋል። ጄ. አፕስ. ኢኮሎጂ. 59, 1596–1607 (2022).
ስጎላስትራ ኤፍ. እና ሌሎችም። ኒዮኒኮቲኖይድ ፀረ-ተባዮች እና የኤርጎስቴሮል ባዮሲንተሲስ በሦስት የንብ ዝርያዎች ውስጥ የፈንገስ ማጥፊያ ሞትን ያቆማሉ። የተባይ መቆጣጠሪያ። ሳይንስ። 73፣ 1236–1243 (2017)።
ኩህኔማን ጄጂ፣ ጊሉንግ ጄ፣ ቫን ዲክ ኤምቲ፣ ፎርድስ አርኤፍ እና ዳንፎርዝ ቢኤን ብቸኛ የተርብ እጮች በአበባ ዱቄት የሚቀርበውን የባክቴሪያ ልዩነት ለግንዱ ጎጆ ንቦች ኦስሚያ ኮርኒፍሮን (ሜጋቺሊዳ) ይለውጣሉ። ግንባር። ረቂቅ ተሕዋስያን። 13፣ 1057626 (2023)።
ዳራምፓል ፒኤስ፣ ዳንፎርዝ ቢኤን እና ስቴፋን ኤስኤ በተፈላ የአበባ ዱቄት ውስጥ የሚገኙት ኤክቶሲምባዮቲክ ረቂቅ ተሕዋስያን እንደ የአበባ ዱቄት ራሱ ለብቻው ንቦች እድገት አስፈላጊ ናቸው። ሥነ ምህዳር። ዝግመተ ለውጥ። 12. e8788 (2022)።
ኬልደርደር ኤም፣ ማኒሲ ኤልኤም፣ ካፑቶ ኤፍ እና ታልሃይመር ኤም. የፖም እርሻዎችን እንደገና የመዝራት በሽታዎችን ለመቆጣጠር በረድፍ መካከል መትከል፡- በማይክሮባላዊ አመልካቾች ላይ የተመሠረተ ተግባራዊ ውጤታማነት ጥናት። የእፅዋት አፈር 357፣ 381–393 (2012)።
ማርቲን ፒኤል፣ ክራቭቺክ ቲ.፣ ኮዳዳዲ ኤፍ.፣ አቺሞቪች ኤስጂ እና ፒተር ኬ.ኤ. በአትላንቲክ ዩናይትድ ስቴትስ መራራ የፖም መበስበስ፡- የምክንያታዊ ዝርያዎች ግምገማ እና የክልል የአየር ሁኔታ ሁኔታዎች እና የተክሎች ተጋላጭነት። ፊቶፓቶሎጂ 111፣ 966–981 (2021)።
ኩለን ኤምጂ፣ ቶምፕሰን ኤልጄ፣ ካሮላን ጄኬ፣ ስታውት ጄኬ። እና ስታንሊ ዲኤ ፈንገሶች፣ አረም ማጥፊያዎች እና ንቦች፡ የነባር ምርምር እና ዘዴዎች ስልታዊ ግምገማ። PLoS One 14፣ e0225743 (2019)።
ፒሊንግ፣ ED እና Jepson፣ PC የ EBI ፈንገስ ማጥፊያዎች እና የፒሬትሮይድ ፀረ-ተባዮች በማር ንቦች ላይ የሚያሳድሩት ተመሳሳይ ተጽእኖ (Apis mellifera)። ሳይንስን የሚጎዱ ተባዮች። 39፣ 293–297 (1993)።
ሙሰን፣ ኢሲ፣ ሎፔዝ፣ ጄኢ እና ፔንግ፣ ሲአይ የተመረጡ ፀረ-ፈንገስ መድኃኒቶች በማር ንብ እጮች እድገት እና እድገት ላይ የሚያሳድሩት ተጽዕኖ አፒስ ሜልፊራ ኤል. (ሃይሜኖፕቴራ፡ አፒዳኢ)። ረቡዕ። ንቶሞር። 33፣ 1151-1154 (2004)።
ቫን ዳይክ፣ ኤም.፣ ሙለን፣ ኢ.፣ ዊክስቴድ፣ ዲ.፣ እና ማክአርት፣ ኤስ. በዛፍ አትክልት ውስጥ የአበባ ዘር አራጊዎችን ለመከላከል የፀረ-ተባይ አጠቃቀም የውሳኔ መመሪያ (ኮርኔል ዩኒቨርሲቲ፣ 2018)።
ኢዋሳኪ፣ ጄኤም እና ሆገንዶርን፣ ኬ. ንቦች ለፀረ-ተባይ ላልሆኑ መድኃኒቶች መጋለጥ፡- የአሠራር ዘዴዎች እና የተዘገቡ ውጤቶች ግምገማ። ግብርና። ሥነ-ምህዳር። ረቡዕ። 314፣ 107423 (2021)።
ኮፒት ኤኤም፣ ክሊንገር ኢ፣ ኮክስ-ፎስተር ዲኤል፣ ራሚሬዝ አርኤ እና ፒትስ-ሲንግ ቲኤል የአቅርቦት አይነት እና ፀረ-ተባይ መጋለጥ በኦስሚያ ሊግናሪያ እጭ እድገት ላይ ያለው ተጽእኖ (Hymenoptera: Megachilidae)። ረቡዕ። ንቶሞር። 51፣ 240–251 (2022)።
ኮፒት ኤኤም እና ፒትስ-ሲንግ ቲኤል ፀረ-ተባይ ማጥፊያ መንገዶች ለባዶ ጎጆ ንቦች ብቻቸውን የመጋለጥ መንገዶች። ረቡዕ። ንቶሞር። 47፣ 499–510 (2018)።
ፓን፣ ኤንቲ እና ሌሎችም። በአዋቂዎች የጃፓን የአትክልት ንቦች (ኦስሚያ ኮርኒፍሮን) ውስጥ ፀረ-ተባይ መርዝን ለመገምገም አዲስ የመግቢያ ባዮአሳይ ፕሮቶኮል (ሳይንስ)። ሪፖርቶች 10፣ 9517 (2020)።