ሰው ሰራሽ ፀረ-ተባይ መድኃኒቶች በስፋት ጥቅም ላይ መዋላቸው ለብዙ ችግሮች ምክንያት ሆኗል፤ ከእነዚህም ውስጥ የመቋቋም ችሎታ ያላቸው ህዋሳት ብቅ ማለት፣ የአካባቢ መበላሸት እና በሰው ጤና ላይ የሚደርሰው ጉዳት ይገኙበታል። ስለዚህ፣ አዳዲስ ማይክሮባላዊፀረ-ተባይ መድኃኒቶችለሰው ልጅ ጤና እና ለአካባቢ ደህንነቱ የተጠበቀ የሆኑ በአስቸኳይ ያስፈልጋሉ። በዚህ ጥናት፣ በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ ኤስጄ2 የሚመረተው ራምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት በትንኝ (Culex quinquefasciatus) እና በተርማይት (Odontotermes obesus) እጭ ላይ ያለውን መርዛማነት ለመገምገም ጥቅም ላይ ውሏል። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት በሕክምናዎች መካከል በመጠን ላይ የተመሰረተ የሞት መጠን ነበር። ለተርማይት እና ትንኝ እጭ ባዮሰርፋክታንትስ በ48 ሰዓታት ውስጥ የLC50 (50% ገዳይ ክምችት) ዋጋ የሚወሰነው መስመራዊ ያልሆነ የሪግሬሽን ኩርባ ፊቲንግ ዘዴን በመጠቀም ነው። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የባዮሰርፋክታንት የላቪሲዳል እና ፀረ-ተርማይት እንቅስቃሴ የ48 ሰዓት LC50 እሴቶች (95% የመተማመን ክፍተት) በቅደም ተከተል 26.49 mg/L (ከ25.40 እስከ 27.57 ክልል) እና 33.43 mg/L (ከ31.09 እስከ 35.68 ክልል) ነበሩ። በሂስቶፓቶሎጂካል ምርመራ መሠረት፣ በባዮሰርፋክታንትስ የሚደረግ ሕክምና በእጭ እና በምስጥ ኦርጋኔል ሕብረ ሕዋሳት ላይ ከፍተኛ ጉዳት አስከትሏል። የዚህ ጥናት ውጤቶች እንደሚያሳዩት በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ ኤስጄ2 የሚመረተው ማይክሮባላዊ ባዮሰርፋክታንት ለCx ቁጥጥር በጣም ጥሩ እና ውጤታማ መሳሪያ ነው። ኳይንኬፋስሲያተስ እና ኦ. ኦቤሰስ።
ሞቃታማ አገሮች ከፍተኛ ቁጥር ያላቸው የወባ ትንኝ ወለድ በሽታዎች ያጋጥሟቸዋል። ትንኝ ወለድ በሽታዎች በስፋት ይስተዋላሉ። በየዓመቱ ከ400,000 በላይ ሰዎች በወባ ይሞታሉ፣ እና አንዳንድ ዋና ዋና ከተሞች እንደ ዴንጊ፣ ቢጫ ወባ፣ ቺኩንጉንያ እና ዚካ ባሉ ከባድ በሽታዎች ወረርሽኝ እያጋጠማቸው ነው።2 በቬክተር የሚተላለፉ በሽታዎች በዓለም ዙሪያ ከስድስት ኢንፌክሽኖች አንዱ ጋር የተቆራኙ ሲሆኑ፣ ትንኞች ከፍተኛውን ቁጥር ያስከትላሉ። 3,4. ኩሌክስ፣ አኖፌልስ እና ኤዴስ በብዛት ከበሽታ ስርጭት ጋር የተያያዙት ሶስት የወባ ትንኝ ዝርያዎች ናቸው። የዴንጊ ትኩሳት ስርጭት፣ በኤዴስ ኤግይፕቲ ትንኝ የሚተላለፍ ኢንፌክሽን፣ ባለፉት አስርት ዓመታት ውስጥ ጨምሯል እና ከፍተኛ የህዝብ ጤና ስጋት ይፈጥራል4,7,8። እንደ የዓለም ጤና ድርጅት (WHO) ገለጻ፣ ከ40% በላይ የሚሆነው የዓለም ህዝብ ለዴንጊ ትኩሳት ተጋላጭ ሲሆን በየዓመቱ ከ100 በላይ በሆኑ አገሮች ውስጥ ከ50-100 ሚሊዮን አዳዲስ ጉዳዮች ይከሰታሉ። የዴንጊ ትኩሳት በዓለም አቀፍ ደረጃ እየጨመረ በመምጣቱ ዋና የህዝብ ጤና ችግር ሆኗል12,13,14. አኖፌልስ ጋምቢያ፣ በተለምዶ የአፍሪካ አኖፌልስ ትንኝ በመባል የሚታወቀው፣ በሐሩር ክልል እና ከፊል ሞቃታማ ክልሎች ውስጥ የሰው ልጅ የወባ በሽታ በጣም አስፈላጊው ተላላፊ ነው።15. የዌስት ናይል ቫይረስ፣ የሴንት ሉዊስ ኢንሴፍላላይትስ፣ የጃፓን ኢንሴፈላላይትስ እና የፈረሶች እና የአእዋፍ የቫይረስ ኢንፌክሽኖች የሚተላለፉት በኩሌክስ ትንኞች ሲሆን ብዙውን ጊዜ የተለመዱ የቤት ትንኞች በመባል ይታወቃሉ። በተጨማሪም፣ የባክቴሪያ እና የጥገኛ በሽታዎች ተሸካሚዎች ናቸው16. በዓለም ላይ ከ3,000 በላይ የምስማር ዝርያዎች አሉ፣ እና ከ150 ሚሊዮን ዓመታት በላይ ኖረዋል።17 አብዛኛዎቹ ተባዮች በአፈር ውስጥ ይኖራሉ እና ሴሉሎስ የያዙ የእንጨት እና የእንጨት ምርቶችን ይመገባሉ። የህንድ ምስጥ ኦዶንቶተርምስ ኦቤሰስ ጠቃሚ ሰብሎችን እና የእፅዋት ዛፎችን ከባድ ጉዳት የሚያደርስ አስፈላጊ ተባይ ነው።18. በግብርና አካባቢዎች፣ በተለያዩ ደረጃዎች የሚደርሱ የምጥ ወረራዎች ለተለያዩ ሰብሎች፣ የዛፍ ዝርያዎች እና የግንባታ ቁሳቁሶች ከፍተኛ የኢኮኖሚ ጉዳት ሊያስከትሉ ይችላሉ። ምስጦችም የሰውን ጤና ችግሮች ሊያስከትሉ ይችላሉ19.
በዛሬው የመድኃኒት እና የግብርና መስኮች ውስጥ ከማይክሮባዮኖች እና ተባዮች የመቋቋም ጉዳይ ውስብስብ ነው20,21። ስለዚህ፣ ሁለቱም ኩባንያዎች አዳዲስ ወጪ ቆጣቢ ፀረ-ተሕዋስያን እና ደህንነቱ የተጠበቀ ባዮፀረ-ተባይ መድኃኒቶችን መፈለግ አለባቸው። ሰው ሰራሽ ፀረ-ተባይ መድኃኒቶች አሁን ይገኛሉ እና ተላላፊ እና ኢላማ ያልሆኑ ጠቃሚ ነፍሳትን የሚከላከሉ መሆናቸውን ታይቷል22። በቅርብ ዓመታት ውስጥ፣ በተለያዩ ኢንዱስትሪዎች ውስጥ በመተግበራቸው ምክንያት በባዮሰርፋክታንቶች ላይ የተደረገው ጥናት ተስፋፍቷል። ባዮሰርፋክታንቶች በግብርና፣ በአፈር ማረም፣ በፔትሮሊየም ማውጣት፣ በባክቴሪያ እና በነፍሳት ማስወገድ እና በምግብ ማቀነባበሪያ ውስጥ በጣም ጠቃሚ እና አስፈላጊ ናቸው። ባዮሰርፋክታንቶች ወይም ማይክሮባይት ሰርፋክታንቶች በባህር ዳርቻ አካባቢዎች እና በዘይት በተበከሉ አካባቢዎች እንደ ባክቴሪያ፣ እርሾ እና ፈንገሶች ባሉ ረቂቅ ተሕዋስያን የሚመረቱ ባዮሰርፋክታንት ኬሚካሎች ናቸው። በኬሚካል የተገኙ ሰርፋክታንቶች እና ባዮሰርፋክታንቶች በቀጥታ ከተፈጥሮ አካባቢ የሚገኙ ሁለት ዓይነቶች ናቸው27። የተለያዩ ባዮሰርፋክታንቶች ከባህር አካባቢዎች ይገኛሉ28,29። ስለዚህ ሳይንቲስቶች በተፈጥሮ ባክቴሪያዎች ላይ የተመሰረቱ ባዮሰርፋክታንቶችን ለማምረት አዳዲስ ቴክኖሎጂዎችን ይፈልጋሉ30,31። በእንደዚህ ዓይነት ምርምር ውስጥ የተደረጉ እድገቶች እነዚህ ባዮሎጂያዊ ውህዶች ለአካባቢ ጥበቃ ያላቸውን ጠቀሜታ ያሳያሉ32. ባሲለስ፣ ፕሴውዶሞናስ፣ ሮዶኮከስ፣ አልካሊጂንስ፣ ኮሪኔባክቴሪየም እና እነዚህ የባክቴሪያ ዝርያዎች በሚገባ የተጠኑ ተወካዮች ናቸው23,33.
የተለያዩ አፕሊኬሽኖች ያሏቸው ብዙ አይነት ባዮሰርፋክታንቶች አሉ34። የእነዚህ ውህዶች ጉልህ ጥቅም አንዳንዶቹ ፀረ-ባክቴሪያ፣ እጭ እና ፀረ-ተባይ እንቅስቃሴ ያላቸው መሆኑ ነው። ይህ ማለት በግብርና፣ በኬሚካል፣ በመድኃኒት እና በኮስሞቲክስ ኢንዱስትሪዎች ውስጥ ጥቅም ላይ ሊውሉ ይችላሉ35,36,37,38። ባዮሰርፋክታንቶች በአጠቃላይ ባዮግራድድ እና ለአካባቢ ተስማሚ ስለሆኑ፣ ሰብሎችን ለመጠበቅ በተቀናጁ የተባይ አስተዳደር ፕሮግራሞች ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ39። ስለዚህ፣ በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ ኤስጄ2 የሚመረቱትን የማይክሮባላዊ ባዮሰርፋክታንቶች የእጭ እና የፀረ-ተርማይት እንቅስቃሴ መሰረታዊ እውቀት ተገኝቷል። ለተለያዩ የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንቶች ክምችት ሲጋለጡ የሞት እና የሂስቶሎጂ ለውጦችን መርምረናል። በተጨማሪም፣ ለማይክሮአልጌ፣ ለዳፍኒያ እና ለዓሳ አጣዳፊ መርዛማነትን ለመወሰን በስፋት ጥቅም ላይ የዋለውን የቁጥር መዋቅር-እንቅስቃሴ (QSAR) የኮምፒውተር ፕሮግራም ሥነ-ምህዳራዊ መዋቅር-እንቅስቃሴ (ECOSAR) ገምግመናል።
በዚህ ጥናት፣ ከ30 እስከ 50 ሚ.ግ./ሚሊ (በ5 ሚ.ግ./ሚሊ ልዩነት) በተለያዩ ክምችቶች የተነጹ ባዮሰርፋክታንቶች ፀረ-ተርማይት እንቅስቃሴ (መርዛማነት) በህንድ ምስጦች፣ ኦ. ኦቤሰስ እና አራተኛ ዝርያዎች ላይ ተፈትኗል። የኢንስታር ሲክስ እጭ። የትንኞች ኩዊንኬፋሲያተስ እጭ። የባዮሰርፋክታንት LC50 ክምችቶች በ48 ሰዓታት ውስጥ በኦ. ኦቤሰስ እና በሲክስ. ሲ. ሶላናሲያረም ላይ ተለይተዋል። የትንኞች እጭዎች በሌለው የሪግሬሽን ኩርባ ፊቲንግ ዘዴ ተለይተዋል። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የምስጢር ሞት እየጨመረ በመጣው የባዮሰርፋክታንት ክምችት መጨመር። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት ባዮሰርፋክታንቱ የእጭ ማጥፊያ እንቅስቃሴ (ምስል 1) እና ፀረ-ምላስ እንቅስቃሴ (ምስል 2) እንዳለው፣ በቅደም ተከተል 26.49 mg/L (ከ25.40 እስከ 27.57) እና 33.43 mg/l (ምስል 31.09 እስከ 35.68) የ48 ሰዓት LC50 እሴቶች (95% CI) (ሠንጠረዥ 1)። አጣዳፊ መርዛማነት (ከ48 ሰዓታት) አንፃር ባዮሰርፋክታንቱ ለተፈተኑት ህዋሳት “ጎጂ” ተብሎ ይመደባል። በዚህ ጥናት ውስጥ የተመረተው ባዮሰርፋክታንት እጅግ በጣም ጥሩ የእጭ ማጥፊያ እንቅስቃሴ አሳይቷል፤ ከተጋለጡ በኋላ በ24-48 ሰዓታት ውስጥ 100% ሞት አስከትሏል።
ለእጭት ማጥፊያ እንቅስቃሴ የLC50 እሴትን አስሉ። ለአንፃራዊ ሞት (%) መስመራዊ ያልሆነ የሪግሬሽን ኩርባ ፊቲንግ (ጠንካራ መስመር) እና 95% የመተማመን ክፍተት (ጥላ ያለው ቦታ)።
ለፀረ-ምላስ እንቅስቃሴ የLC50 እሴትን አስሉ። ለአንፃራዊ ሞት (%) መስመራዊ ያልሆነ የሪግሬሽን ኩርባ ፊቲንግ (ጠንካራ መስመር) እና 95% የመተማመን ክፍተት (ጥላ ያለው ቦታ)።
በሙከራው መጨረሻ ላይ የሞርፎሎጂ ለውጦች እና ያልተለመዱ ነገሮች በማይክሮስኮፕ ስር ታይተዋል። በቁጥጥር እና በታከሙ ቡድኖች ውስጥ በ40 እጥፍ ማጉላት የሞርፎሎጂ ለውጦች ታይተዋል። በምስል 3 ላይ እንደሚታየው፣ በባዮሰርፋክታንትስ በሚታከሙ አብዛኛዎቹ እጭዎች ላይ የእድገት እክል ተከስቷል። ምስል 3a መደበኛ Cx. quinquefasciatus ያሳያል፣ ምስል 3b ያልተለመደ Cx ያሳያል። አምስት የኒማቶድ እጭዎችን ያስከትላል።
የባዮሰርፋክታንትስ (LC50) መጠን በኩሌክስ ኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች እድገት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ። በ40× ማጉላት ላይ የተለመደው Cx ቀላል ማይክሮስኮፒ ምስል (ሀ)። ኩዊንኬፋሲያተስ (ለ) ያልተለመደ Cx። አምስት የኔማቶድ እጭዎችን ያስከትላል።
በዚህ ጥናት፣ የታከሙ እጭዎችን (ምስል 4) እና ምስጦችን (ምስል 5) የሂስቶሎጂ ምርመራ በርካታ ያልተለመዱ ነገሮችን አሳይቷል፣ ይህም የሆድ አካባቢ መቀነስ እና በጡንቻዎች፣ በኤፒተልየል ሽፋኖች እና በቆዳ ላይ የሚደርስ ጉዳትን ጨምሮ። ሂስቶሎጂ በዚህ ጥናት ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለውን ባዮሰርፋክታንት የመከልከል እንቅስቃሴ ዘዴን አሳይቷል።
መደበኛ ያልታከሙ የ4ኛ ደረጃ የCx እጭዎች ሂስቶፓቶሎጂ። የኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች (ቁጥጥር፡ (a,b)) እና በባዮሰርፋክታንት (ህክምና፡ (c,d)) የታከሙ። ቀስቶች የታከሙ የአንጀት ኤፒተልየም (epi)፣ ኒውክሊየስ (n) እና ጡንቻ (mu) ያመለክታሉ። ባር = 50 µm።
መደበኛ ያልታከመ ኦ. ኦቤሰስ (ቁጥጥር፡ (a,b)) እና ባዮሰርፋክታንት (ህክምና፡ (c,d)) ሂስቶፓቶሎጂ። ቀስቶቹ የአንጀት ኤፒተልየም (epii) እና ጡንቻ (mu) በቅደም ተከተል ያመለክታሉ። ባር = 50 µm።
በዚህ ጥናት ውስጥ፣ ECOSAR ለዋና አምራቾች (አረንጓዴ አልጌ)፣ ለዋና ተጠቃሚዎች (የውሃ ቁንጫዎች) እና ለሁለተኛ ሸማቾች (ዓሳ) የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት ምርቶች አጣዳፊ መርዛማነት ለመተንበይ ጥቅም ላይ ውሏል። ይህ ፕሮግራም በሞለኪውላር መዋቅር ላይ ተመስርቶ መርዛማነትን ለመገምገም የተራቀቁ የቁጥር መዋቅራዊ-እንቅስቃሴ ውህድ ሞዴሎችን ይጠቀማል። ሞዴሉ በውሃ ውስጥ ለሚኖሩ ዝርያዎች አጣዳፊ እና የረጅም ጊዜ መርዛማነት ለማስላት የመዋቅር-እንቅስቃሴ (SAR) ሶፍትዌርን ይጠቀማል። በተለይም፣ ሠንጠረዥ 2 ለብዙ ዝርያዎች የሚገመተውን አማካይ ገዳይ ክምችቶች (LC50) እና አማካይ ውጤታማ ክምችቶች (EC50) ያጠቃልላል። የተጠረጠረ መርዛማነት በዓለም አቀፍ ደረጃ የተጣጣመ የኬሚካሎች ምደባ እና መለያ ስርዓትን በመጠቀም በአራት ደረጃዎች ተመድቧል (ሠንጠረዥ 3)።
በቬክተር የሚተላለፉ በሽታዎችን መቆጣጠር፣ በተለይም የትንኞች እና የኤዴስ ትንኞች ዝርያዎች። ግብፃውያን፣ አሁን አስቸጋሪ ሥራ 40,41,42,43,44,45,46። እንደ ፒሬትሮይድ እና ኦርጋኖፎስፌት ያሉ አንዳንድ በኬሚካል የሚገኙ ፀረ-ተባይ መድኃኒቶች በተወሰነ ደረጃ ጠቃሚ ቢሆኑም፣ የስኳር በሽታ፣ የመራቢያ ችግሮች፣ የነርቭ መዛባት፣ ካንሰር እና የመተንፈሻ አካላት በሽታዎችን ጨምሮ ለሰው ልጅ ጤና ከፍተኛ አደጋዎችን ያስከትላሉ። ከዚህም በላይ፣ ከጊዜ በኋላ እነዚህ ነፍሳት ሊቋቋሙት ይችላሉ13,43,48። ስለዚህ፣ ውጤታማ እና ለአካባቢ ተስማሚ የሆኑ ባዮሎጂካል ቁጥጥር እርምጃዎች ይበልጥ ተወዳጅ የትንኝ መቆጣጠሪያ ዘዴ ይሆናሉ49,50። ቤኔሊ51 የትንኝ ቬክተሮችን ቀደም ብሎ መቆጣጠር በከተማ አካባቢዎች የበለጠ ውጤታማ እንደሚሆን ጠቁመዋል፣ ነገር ግን በገጠር አካባቢዎች እጭዎችን መጠቀምን አልመከሩም52። ቶም እና ሌሎች 53 እንዲሁም ትንኞችን ባልበሰሉበት ደረጃ ላይ መቆጣጠር ደህንነቱ የተጠበቀ እና ቀላል ስትራቴጂ እንደሚሆን ጠቁመዋል ምክንያቱም ለቁጥጥር ወኪሎች የበለጠ ስሜታዊ ናቸው 54።
በኃይለኛ ዝርያ (ኢንቴሮባክተር ክሎአኬ SJ2) የሚመረተው ባዮሰርፋክታንት ወጥ የሆነ እና ተስፋ ሰጪ ውጤታማነት አሳይቷል። ቀደም ሲል ያደረግነው ጥናት Enterobacter cloacae SJ2 የባዮሰርፋክታንት ምርትን በፊዚኮኬሚካላዊ መለኪያዎች26 በመጠቀም እንደሚያመቻች ዘግቧል። በጥናታቸው መሠረት፣ በ E. cloacae isolate አማካኝነት ለባዮሰርፋክታንት ምርት ተስማሚ ሁኔታዎች ለ36 ሰዓታት መቆለፍ፣ በ150 rpm መነቃቃት፣ pH 7.5፣ 37 °C፣ ጨዋማነት 1 ppt፣ 2% ግሉኮስ እንደ ካርቦን ምንጭ፣ 1% እርሾ ነበሩ። ማውጣት 2.61 ግ/ሊ ባዮሰርፋክታንት ለማግኘት እንደ ናይትሮጅን ምንጭ ጥቅም ላይ ውሏል። በተጨማሪም፣ ባዮሰርፋክታንትስ TLC፣ FTIR እና MALDI-TOF-MS በመጠቀም ተለይተው ይታወቃሉ። ይህም rhamnolipid ባዮሰርፋክታንት መሆኑን አረጋግጧል። ግላይኮሊፒድ ባዮሰርፋክታንትስ ከሌሎች የባዮሰርፋክታንትስ ዓይነቶች በጣም የተጠኑት ክፍል ናቸው55። ካርቦሃይድሬት እና የሊፒድ ክፍሎችን፣ በተለይም የሰባ አሲድ ሰንሰለቶችን ያካትታሉ። ከግላይኮሊፒድስ መካከል ዋና ዋናዎቹ ወኪሎች rhamnolipid እና sophorolipid56 ናቸው። rhamnolipids ከሞኖ- ወይም ዳይ-β-hydroxydecanoic acid57 ጋር የተያያዙ ሁለት የrhamnose ክፍሎችን ይይዛሉ። rhamnolipids በሕክምና እና በመድኃኒት ኢንዱስትሪዎች ውስጥ ጥቅም ላይ መዋላቸው በቅርብ ጊዜ እንደ ፀረ-ተባይ 59 ከመጠቀም በተጨማሪ በሚገባ የተረጋገጠ ነው።
የባዮሰርፋክታንት ከአየር መተንፈሻ ሲፎን ሃይድሮፎቢክ ክልል ጋር ያለው መስተጋብር ውሃ በሆዱ ውስጥ እንዲያልፍ ያስችለዋል፣ በዚህም የእጮቹን ከውሃ ውስጥ ካለው አካባቢ ጋር ያለውን ግንኙነት ይጨምራል። የባዮሰርፋክታንት መኖርም ትራኪያን ይነካዋል፣ ርዝመቱ ከላዩ ጋር ቅርብ ሲሆን እጮቹ ወደ ላይኛው ክፍል እንዲሳቡ እና እንዲተነፍሱ ቀላል ያደርገዋል። በዚህም ምክንያት የውሃው የገጽታ ውጥረት ይቀንሳል። እጮቹ ከውሃው ወለል ጋር መጣበቅ ስለማይችሉ፣ ወደ ታንክ ግርጌ ይወድቃሉ፣ ይህም የሃይድሮስታቲክ ግፊትን ያደናቅፋል፣ ይህም ከመጠን በላይ የኃይል ወጪን እና በመጥለቅ ሞትን ያስከትላል38,60። ተመሳሳይ ውጤቶች የተገኙት በግሪቢ61 ሲሆን፣ በባሲለስ ሰብቲሊስ የሚመረተው ባዮሰርፋክታንት በኤፌስቲያ ኩህኒዬላ ላይ የእጭነት እንቅስቃሴን አሳይቷል። በተመሳሳይ፣ የCx. Das እና Mukherjee23 የእጭነት እንቅስቃሴ በኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች ላይ የሳይክሊክ ሊፖፔፕታይዶችን ተጽእኖ ገምግመዋል።
የዚህ ጥናት ውጤቶች በCx ላይ የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት የእጭነት እንቅስቃሴን ይመለከታሉ። የኩዊንኬፋሲያተስ ትንኞችን መግደል ቀደም ሲል ከታተሙ ውጤቶች ጋር የሚጣጣም ነው። ለምሳሌ፣ በተለያዩ የባክለስ ዝርያ ባክቴሪያዎች የሚመረቱ ሰርፋክቲን-ተኮር ባዮሰርፋክታንቶች ጥቅም ላይ ይውላሉ። እና Pseudomonas spp። አንዳንድ የመጀመሪያ ሪፖርቶች64,65,66 ከባክለስ ሰብቲሊስ23 የሊፖፔፕታይድ ባዮሰርፋክታንት እጭ-ገዳይ እንቅስቃሴ ሪፖርት አድርገዋል። ዲፓሊ እና ሌሎች 63 ከስቴኖትሮፖሞናስ ማልቶፊሊያ የተነጠለው ራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት በ10 ሚ.ግ/ሊ ክምችት ኃይለኛ የእጭነት እንቅስቃሴ እንዳለው አረጋግጠዋል። ሲልቫ እና ሌሎች 67 በ1 ግ/ሊ ክምችት በAe ላይ የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት የእጭነት እንቅስቃሴ ሪፖርት አድርገዋል። ኤዴስ ኤግይፕቲ። ካናክዳንዴ እና ሌሎች። 68 ባሲለስ ሰብቲሊስ የሚያመነጩት የሊፖፔፕታይድ ባዮሰርፋክታንቶች በኩሌክስ እጭ እና ምስጦች ላይ የዩካሊፕተስ ሊፖፊሊክ ክፍልፋይ አጠቃላይ ሞት እንዳስከተሉ ሪፖርት አድርገዋል። በተመሳሳይ፣ ማሴንድራ እና ሌሎች 69 በሊፖፊሊክ n-hexane እና EtOAc ክፍልፋዮች ውስጥ የሰራተኛ ጉንዳን (Cryptotermes cynocephalus Light.) ሞት 61.7% መሆኑን ሪፖርት አድርገዋል።
ፓርቲፓን እና ሌሎች 70 ባሲለስ ሰብቲሊስ A1 እና ፕሴውዶሞናስ ስቱትዜሪ NA3 የሚያመነጩትን የሊፖፔፕታይድ ባዮሰርፋክታንቶች የወባ ተውሳክ ፕላስሞዲየም ቬክተር በሆነው አኖፌልስ ስቴፈንሲ ላይ የተባይ ማጥፊያ መድኃኒቶችን መጠቀምን ዘግበዋል። እጭ እና ሙሽሬዎች ረዘም ላለ ጊዜ እንደሚኖሩ፣ አጭር የእንቁላሉ ጊዜ እንዳላቸው፣ ንፁህ እንደሆኑ እና በተለያዩ የባዮሰርፋክታንቶች ክምችት ሲታከሙ አጭር የህይወት ዘመን እንዳላቸው አስተውለዋል። የቢ. ሰብቲሊስ ባዮሰርፋክታንት A1 የታዩት የLC50 እሴቶች ለተለያዩ የእጭ ግዛቶች (ማለትም እጭ I፣ II፣ III፣ IV እና ደረጃ ፑፔ) በቅደም ተከተል 3.58፣ 4.92፣ 5.37፣ 7.10 እና 7.99 mg/L ነበሩ። በንጽጽር ሲታይ፣ የፕሴውዶሞናስ ስቱትዜሪ NA3 የእጭ ደረጃዎች I-IV እና የፑፓል ደረጃዎች ባዮሰርፋክታንቶች በቅደም ተከተል 2.61፣ 3.68፣ 4.48፣ 5.55 እና 6.99 mg/L ነበሩ። የተረፉት እጮችና ሙሽሬዎች የዘገዩበት ሁኔታ በፀረ-ተባይ ሕክምናዎች ምክንያት በሚከሰቱ ጉልህ የፊዚዮሎጂና የሜታቦሊክ ችግሮች ምክንያት እንደሆነ ይታሰባል።71.
የዊከርሃሞሚሴስ አኖማለስ ዝርያ CCMA 0358 በኤዲስ ትንኞች ላይ 100% የእጭ ማጥፊያ እንቅስቃሴ ያለው ባዮሰርፋክታንት ያመነጫል። aegypti የ24-ሰዓት ክፍተት 38 ሲልቫ እና ሌሎች ከተዘገበው በላይ ነበር። ከፕሴዩዶሞናስ አዌጉኒኖሳ የሱፍ አበባ ዘይትን እንደ ካርቦን ምንጭ በመጠቀም የሚመረተው ባዮሰርፋክታንት በ48 ሰዓታት ውስጥ 100% እጮችን እንደሚገድል ታይቷል 67። አቢናያ እና ሌሎች 72 እና ፕራዳን እና ሌሎች 73 እንዲሁም በርካታ የባክለስ ዝርያ ዝርያዎች በሚመነጩት ሰርፋክታንቶች ላይ የእጭ ማጥፊያ ወይም የተባይ ማጥፊያ ተፅእኖዎችን አሳይተዋል። ቀደም ሲል በሴንትሂል-ናታን እና ሌሎች በታተሙ ጥናቶች መሠረት 100% የሚሆኑት ለእፅዋት ሐይቆች የተጋለጡ የወባ ትንኝ እጮች የመሞት ዕድላቸው ከፍተኛ ነው። 74.
ፀረ-ተባዮች በነፍሳት ባዮሎጂ ላይ የሚያሳድሩትን ገዳይ ውጤት መገምገም ለተቀናጁ የተባይ መቆጣጠሪያ ፕሮግራሞች ወሳኝ ነው ምክንያቱም ከፊል ገዳይ መጠኖች/ክምችቶች ነፍሳትን አይገድሉም ነገር ግን በወደፊት ትውልዶች ውስጥ የነፍሳት ብዛትን ባዮሎጂያዊ ባህሪያትን በማበላሸት ሊቀንስ ይችላል።10. ሲኪራ እና ሌሎች 75 ከ50 እስከ 300 ሚ.ግ./ሚ.ግ. ድረስ በተለያዩ ክምችቶች ሲፈተሹ የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት (300 ሚ.ግ./ሚ.ግ.) ሙሉ የእጭ መከላከያ እንቅስቃሴ (100% ሞት) ተመልክተዋል። የኤዴስ አጊፕቲ ዝርያዎች የእጭ ደረጃ። የጊዜ እስከ ሞት እና የከርሰ ምድር ክምችት በእጭ ህልውና እና በመዋኛ እንቅስቃሴ ላይ ያለውን ተጽእኖ ተንትነዋል። በተጨማሪም፣ ከ24-48 ሰዓታት ውስጥ ለከርሰ ምድር ገዳይ ክምችቶች (ለምሳሌ 50 ሚ.ግ./ሚ.ግ. እና 100 ሚ.ግ./ሚ.ግ. ከተጋለጡ በኋላ የመዋኛ ፍጥነት መቀነስን አስተውለዋል። ተስፋ ሰጪ የከርሰ ምድር ሚና ያላቸው መርዞች በተጋለጡ ተባዮች ላይ ብዙ ጉዳት በማድረስ ረገድ የበለጠ ውጤታማ እንደሆኑ ይታሰባል።76.
የውጤቶቻችን ሂስቶሎጂካል ምልከታዎች እንደሚያሳዩት በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ ኤስጄ2 የሚመረቱት ባዮሰርፋክታንቶች የወባ ትንኝ (Cx. quinquefasciatus) እና የተርማይት (O. obesus) እጭዎች ሕብረ ሕዋሳትን በእጅጉ ይለውጣሉ። ተመሳሳይ ያልተለመዱ ነገሮች የተከሰቱት በአን. gambiaes.s እና በአን. arabica ውስጥ ባለው የባሲል ዘይት ዝግጅት ምክንያት ነው። ካማራጅ እና ሌሎችም በአን.78 ውስጥ ተመሳሳይ ሞርፎሎጂያዊ ያልተለመዱ ነገሮችን ገልጸዋል። የስቴፋኒ እጭዎች ለወርቅ ናኖፓርቲክሎች ተጋልጠዋል። ቫሳንታ-ስሪኒቫሳን እና ሌሎችም 79 የእረኛው ቦርሳ አስፈላጊ ዘይት የኤዲስ አልቦፒክተስ ክፍል እና ኤፒተልየል ንብርብሮችን በእጅጉ እንደጎዳ ዘግበዋል። ኤዲስ አጊፕቲ። ራጋቨንድራን እና ሌሎችም የትንኝ እጭዎች በአካባቢው ፔኒሲሊየም ፈንገስ 500 mg/ml ማይሴሊያል ማውጣት እንደታከሙ ዘግበዋል። ኤኢ ከባድ የሂስቶሎጂ ጉዳት ያሳያሉ። ኤጂፕቲ እና ሲክስ። የሞት መጠን 80። ቀደም ሲል አቢናያ እና ሌሎችም አራተኛው የአን እጭዎች ጥናት ተደርጎባቸዋል። ስቴፈንሲ እና ኤኢ. ኤጂፕቲ በቢ. ሊቼኒፎርሚስ ኤክሶፖሊሳክራይድስ የታከመው ኤዴስ ኤግይፕቲ ውስጥ በርካታ የሂስቶሎጂ ለውጦችን አግኝተዋል፣ እነዚህም የጨጓራ ሴኩም፣ የጡንቻ መመንጠር፣ የነርቭ ገመድ ጋንግሊያ ጉዳት እና አለመደራጀት72ን ያካትታሉ። እንደ ራጋቨንድራን እና ሌሎች ገለጻ፣ በፒ. ዳሌኤ ማይሴሊያል ማውጣት ከታከሙ በኋላ፣ የተፈተኑ ትንኞች (4ኛ ኢንስታር እጭ) የሚድጉት ሴሎች የአንጀት lumen እብጠት፣ የሴል ይዘቶች መቀነስ እና የኑክሌር መበላሸት አሳይተዋል81። ተመሳሳይ የሂስቶሎጂ ለውጦች በኤቺናሴአ ቅጠል ማውጣት በተያዙ የትንኝ እጭዎች ላይ ታይተዋል፣ ይህም የታከሙ ውህዶች የነፍሳት ማጥፊያ አቅምን ያመለክታል50።
የECOSAR ሶፍትዌር አጠቃቀም ዓለም አቀፍ እውቅና አግኝቷል82። የአሁኑ ጥናት እንደሚያሳየው የECOSAR ባዮሰርፋክታንቶች ለማይክሮአልጌ (ሲ. ቩልጋሪስ)፣ ለዓሳ እና ለውሃ ቁንጫዎች (ዲ. ማግና) የሚወስዱት አጣዳፊ መርዛማነት በተባበሩት መንግስታት 83 በተገለጸው "መርዛማነት" ምድብ ውስጥ ይወድቃል። የECOSAR ኢኮቶክሲቲዝም ሞዴል የንጥረ ነገሮችን አጣዳፊ እና የረጅም ጊዜ መርዛማነት ለመተንበይ SAR እና QSAR ይጠቀማል እና ብዙውን ጊዜ የኦርጋኒክ ብክለቶችን መርዛማነት ለመተንበይ ይጠቅማል82,84።
ፓራፎርማልዴሂድ፣ ሶዲየም ፎስፌት ባፈር (pH 7.4) እና በዚህ ጥናት ውስጥ ጥቅም ላይ የዋሉ ሌሎች ኬሚካሎች በሙሉ የተገዙት ከሂሚዲያ ላቦራቶሪዎች፣ ህንድ ነው።
የባዮሰርፋክታንት ምርት የተከናወነው 200 ሚሊ ሊትር የጸዳ የቡሽኔል ሃስ መካከለኛ በያዙ 500 ሚሊ ሊትር የኤርለንሜየር ብልቃጦች ውስጥ ሲሆን 1% ጥሬ ዘይት እንደ ብቸኛ የካርቦን ምንጭ ተደርጎ ተጨምሮበታል። የኢንቴሮባክተር ክሎአኬ SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) ቅድመ-እርባታ በ37°ሴ፣ 200 rpm ለ7 ቀናት በኦርቢታል ሻከር ላይ ተከተቦ ተክሏል። የመታቀፉን ጊዜ ካጠናቀቁ በኋላ፣ ባዮሰርፋክታንት በ4°ሴ ለ20 ደቂቃ በ3400×ግ በማጣሪያ በማውጣት የባህል መካከለኛውን በማጣሪያ በማውጣት ተወግዷል እና የተገኘው ሱፐርናታንት ለማጣሪያ ዓላማዎች ጥቅም ላይ ውሏል። የባዮሰርፋክታንት የማመቻቸት ሂደቶች እና የባዮሰርፋክታንት ባህሪ ከቀደመው ጥናታችን 26 ላይ ተወስደዋል።
የኩሌክስ ኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች የተገኙት ከማዕከላዊ የባህር ባዮሎጂ የላቀ ጥናት ማዕከል (CAS)፣ ፓላንቺፔታይ፣ ታሚል ናዱ (ህንድ) ነው። እጭዎቹ የሚያድጉት በ27 ± 2°ሴ እና በ12፡12 (ቀላል፡ጨለማ) የሙቀት መጠን በተሞሉ የፕላስቲክ መያዣዎች ውስጥ ነው። የትንኝ እጭዎች 10% የግሉኮስ መፍትሄ ተሰጥቷቸዋል።
የኩሌክስ ኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች ክፍት እና ያልተጠበቁ የሴፕቲክ ታንኮች ውስጥ ተገኝተዋል። በላብራቶሪ ውስጥ እጭዎችን ለመለየት እና ለማልማት መደበኛ የምደባ መመሪያዎችን ይጠቀሙ። 85. የእጭ ማጥፊያ ሙከራዎች የተከናወኑት በዓለም ጤና ድርጅት 86 ምክሮች መሠረት ነው። ኤች. አራተኛው የኩዊንኬፋሲያተስ እጭዎች በተዘጉ ቱቦዎች ውስጥ በ25 ሚሊ ሊትር እና 50 ሚሊ ሊትር ቡድኖች ውስጥ ከአቅማቸው ሁለት ሶስተኛ የአየር ክፍተት ተሰጥቷቸዋል። ባዮሰርፋክታንት (0-50 ሚ.ግ./ሚሊ) በእያንዳንዱ ቱቦ ውስጥ በተናጠል ተጨምሮ በ25 ° ሴ ተቀምጧል። የመቆጣጠሪያ ቱቦው የተቀዳ ውሃ ብቻ ተጠቅሟል (50 ሚሊ ሊትር)። የሞቱ እጭዎች በማቆያ ጊዜ (12-48 ሰዓታት) ምንም አይነት የመዋኛ ምልክት ያላሳዩ እንደሆኑ ተቆጥረዋል። 87. እኩልታውን በመጠቀም የእጭ ሞት መቶኛን አስሉ። (1)88.
የኦዶንቶተርሚቲዳ ቤተሰብ በግብርና ካምፓስ (አናማላይ ዩኒቨርሲቲ፣ ህንድ) ውስጥ በሚበሰብስ እንጨት ውስጥ የሚገኘውን የህንድ ተርሚት ኦዶንቶተርመስ ኦቤሰስን ያካትታል። ጎጂ መሆኑን ለማወቅ ይህንን ባዮሰርፋክታንት (0-50 mg/ml) በመደበኛ ሂደቶች በመጠቀም ይመርምሩ። በላሚናር የአየር ፍሰት ውስጥ ለ30 ደቂቃዎች ከደረቀ በኋላ፣ እያንዳንዱ የዋትማን ወረቀት ቁራጭ በ30፣ 40 ወይም 50 mg/ml ክምችት በባዮሰርፋክታንት ተሸፍኗል። ቀድሞ የተሸፈኑ እና ያልተሸፈኑ የወረቀት ቁርጥራጮች ተፈትነው በፔትሪ ምግብ መሃል ላይ ተነጻጽረዋል። እያንዳንዱ የፔትሪ ምግብ ወደ ሠላሳ የሚጠጉ ንቁ ተርሚቶች ኦ. ኦቤሰስ ይዟል። የቁጥጥር እና የሙከራ ተርሚቶች እንደ ምግብ ምንጭ እርጥብ ወረቀት ተሰጥቷቸዋል። ሁሉም ሳህኖች በማቆያ ጊዜ ውስጥ በክፍል ሙቀት ውስጥ ተጠብቀዋል። ተርሚቶች ከ12፣ 24፣ 36 እና 48 ሰዓታት በኋላ ሞቱ 89,90። ከዚያም እኩልታ 1 በተለያዩ ባዮሰርፋክታንት ክምችት ውስጥ የተርሚቶች ሞት መቶኛን ለመገመት ጥቅም ላይ ውሏል። (2)።
ናሙናዎቹ በበረዶ ላይ ተቀምጠው 100 ሚሊ ሊትር 0.1 M የሶዲየም ፎስፌት ቋት (pH 7.4) በያዙ ማይክሮቱቦች ውስጥ ታሽገው ወደ ራጂቭ ጋንዲ የአኳካልቸር ማዕከል (RGCA) ማዕከላዊ የአኳካልቸር ፓቶሎጂ ላቦራቶሪ (CAPL) ተልከዋል። ሂስቶሎጂ ላቦራቶሪ፣ ሲርካሊ፣ ማይላዱቱራይ። ዲስትሪክት፣ ታሚል ናዱ፣ ህንድ ለተጨማሪ ትንተና። ናሙናዎቹ ወዲያውኑ በ37°ሴ በ4% ፓራፎርማሌዴይድ ውስጥ ለ48 ሰዓታት ተስተካክለዋል።
ከተስተካከለው ደረጃ በኋላ፣ ቁሱ በ0.1 M ሶዲየም ፎስፌት ቋት (pH 7.4) ሶስት ጊዜ ታጥቧል፣ ደረጃ በደረጃ በኤታኖል ውስጥ ደርቆ ለ7 ቀናት በLEICA ሙጫ ውስጥ ተጠብሷል። ከዚያም ንጥረ ነገሩ በሙጫ እና ፖሊመሪዘር በተሞላ የፕላስቲክ ሻጋታ ውስጥ ይቀመጣል፣ ከዚያም ንጥረ ነገሩ የያዘው ብሎክ ሙሉ በሙሉ ፖሊመሪ እስኪሆን ድረስ እስከ 37°ሴ ድረስ በሚሞቅ ምድጃ ውስጥ ይቀመጣል።
ፖሊሜራይዜሽን ከተደረገ በኋላ፣ ብሎኮቹ በLEICA RM2235 ማይክሮቶም (ራንኪን ባዮሜዲካል ኮርፖሬሽን 10,399 ኢንተርፕራይዝ ዶ/ር ዴቪስበርግ፣ ኤምአይ 48,350፣ ዩኤስኤ) በመጠቀም ተቆርጠዋል። ክፍሎቹ በስላይድ ላይ በቡድን ተከፋፍለዋል፣ በእያንዳንዱ ስላይድ ስድስት ክፍሎች አሏቸው። ስላይዶቹ በክፍል ሙቀት ደርቀዋል፣ ከዚያም ለ7 ደቂቃዎች በሄማቶክሲሊን ቀለም ተቀባ እና ለ4 ደቂቃዎች በሚፈስ ውሃ ታጥበዋል። በተጨማሪም የኢኦሲን መፍትሄውን በቆዳ ላይ ለ5 ደቂቃዎች ይተግብሩ እና ለ5 ደቂቃዎች በሚፈስ ውሃ ያጠቡ።
አጣዳፊ መርዛማነት ከተለያዩ ሞቃታማ አካባቢዎች በሚገኙ የውሃ ውስጥ ፍጥረታትን በመጠቀም ተተንብዮ ነበር፡ 96-ሰዓት የዓሣ LC50፣ 48-ሰዓት D. magna LC50 እና 96-ሰዓት የአረንጓዴ አልጌ EC50። የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንቶች ለዓሣ እና ለአረንጓዴ አልጌ ያላቸው መርዛማነት በአሜሪካ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ በተሰራው የዊንዶውስ ECOSAR ሶፍትዌር ስሪት 2.2 በመጠቀም ተገምግሟል። (በ https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model ላይ በመስመር ላይ ይገኛል)።
ሁሉም የእጭ እና የመርዝ መከላከያ እንቅስቃሴ ሙከራዎች በሦስት እጥፍ ተከናውነዋል። አማካይ ገዳይ ክምችት (LC50) በ95% የመተማመን ክፍተት ለማስላት የእጭ እና የተርሚስ ሞት መረጃ መስመራዊ ያልሆነ ሪግሬሽን (የመጠን ምላሽ ተለዋዋጮች መዝገብ) ተከናውኗል፣ እና የትኩረት ምላሽ ኩርባዎች የተፈጠሩት ፕሪዝም® (ስሪት 8.0፣ GraphPad Software) Inc.፣ ዩኤስኤ) 84፣ 91 በመጠቀም ነው።
የአሁኑ ጥናት በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ SJ2 የሚመረቱት የማይክሮባላዊ ባዮሰርፋክታንቶች እንደ ትንኝ እጭ እና ፀረ-ተርማይት ወኪሎች ሊሆኑ እንደሚችሉ ያሳያል፣ እና ይህ ስራ የላቪክታል እና ፀረ-ተርማይት እርምጃ ዘዴዎችን በተሻለ ለመረዳት ይረዳል። በባዮሰርፋክታንት የታከሙ እጭዎች ሂስቶሎጂካል ጥናቶች የአንጀት ኤፒተልየል ሴሎች የምግብ መፈጨት ትራክት፣ ሚድጉት፣ ሴሬብራል ኮርቴክስ እና ሃይፐርፕላዝያ ላይ ጉዳት እንዳደረሱ አሳይተዋል። ውጤቶች፡ በኢንቴሮባክተር ክሎአኬ SJ2 የሚመረተውን የራሃምኖሊፒድ ባዮሰርፋክታንት ፀረ-ተርማይት እና ላቪክታል እንቅስቃሴ መርዛማ ግምገማ ይህ ለይቶ ማግለል የትንኝ ትንኞችን (Cx quinquefasciatus) እና ምስጦችን (O. obesus) በቬክተር-ወለድ በሽታዎች ለመቆጣጠር የሚያስችል ባዮፀረ-ተባይ መሆኑን አረጋግጧል። የባዮሰርፋክታንትስን መሰረታዊ የአካባቢ መርዛማነት እና ሊኖሩ የሚችሉ የአካባቢ ተፅእኖዎችን መረዳት ያስፈልጋል። ይህ ጥናት የባዮሰርፋክታንትስን የአካባቢ አደጋ ለመገምገም ሳይንሳዊ መሠረት ይሰጣል።
የፖስታ ሰዓት፡- ኤፕሪል-09-2024