የንግድ የሳይፐርሜትሪን ዝግጅቶች ሞት እና መርዝ ወደ ትናንሽ የውሃ ታድፖሎች

ይህ ጥናት የንግድ ገዳይነት፣ ረቂቅነት እና መርዛማነት ገምግሟልሳይፐርሜትሪንአኑራን tadpoles ወደ formulations. በአጣዳፊ ፈተና ውስጥ, የ 100-800 μg / ሊ ውህዶች ለ 96 ሰአታት ተፈትነዋል. በከባድ ፈተና ውስጥ በተፈጥሮ የተገኘ የሳይፐርሜትሪን ክምችት (1, 3, 6, እና 20 μg/L) ለሟችነት ተፈትኗል, ከዚያም የማይክሮኑክሊየስ ምርመራ እና የቀይ የደም ሴሎች የኑክሌር መዛባት ለ 7 ቀናት. የንግድ የሳይፐርሜትሪን ፎርሙላ ወደ ታድፖልስ 273.41 μg L-1 ነበር። በከባድ ፈተና ውስጥ, ከፍተኛው ትኩረት (20 μg L-1) ከ 50% በላይ ሞትን አስከትሏል, ምክንያቱም ከተሞከሩት ታድፖሎች ውስጥ ግማሹን ገድሏል. የማይክሮኑክሊየስ ሙከራው በ 6 እና 20 μg L-1 ላይ ከፍተኛ ውጤቶችን አሳይቷል እና በርካታ የኑክሌር እክሎች ተገኝተዋል, ይህም የንግድ ሳይፐርሜትሪን አጻጻፍ በፒ.ግራሲሊስ ላይ የጂኖቶክሲካል አቅም እንዳለው ያሳያል. ሳይፐርሜትሪን ለዚህ ዝርያ ከፍተኛ አደጋ ነው, ይህም ብዙ ችግሮችን ሊያስከትል እና በአጭር እና በረጅም ጊዜ ውስጥ የዚህን ስነ-ምህዳር ተለዋዋጭነት ላይ ተጽዕኖ እንደሚያሳድር ያመለክታል. ስለዚህ, የንግድ የሳይፐርሜትሪን ቀመሮች በ P. gracilis ላይ መርዛማ ተጽእኖ እንዳላቸው መደምደም ይቻላል.
የግብርና ስራዎች ቀጣይነት ያለው መስፋፋት እና ጥልቅ አተገባበር ምክንያትየተባይ መቆጣጠሪያመለኪያዎች፣ የውሃ ውስጥ እንስሳት በተደጋጋሚ ለፀረ-ተባይ መድሃኒቶች ይጋለጣሉ1፣2. በእርሻ ቦታዎች አቅራቢያ የውሃ ሀብቶች መበከል እንደ አምፊቢያን ያሉ ኢላማ ያልሆኑ ፍጥረታት እድገት እና ህልውና ላይ ተጽእኖ ሊያሳድር ይችላል.
የአካባቢ ማትሪክስ ግምገማ ውስጥ Amphibians በጣም አስፈላጊ እየሆኑ መጥተዋል። አኑራንስ እንደ ውስብስብ የህይወት ኡደቶች ፣ ፈጣን እጭ እድገት ፣ trophic ደረጃ ፣ ሊበቅል የሚችል ቆዳ10,11 ፣ ለመራባት በውሃ ላይ ጥገኛ 12 እና ያልተጠበቁ እንቁላሎች 11,13,14 ባሉ ልዩ ባህሪያቸው ምክንያት የአካባቢ ብክለትን እንደ ጥሩ ባዮይዳይተሮች ይቆጠራሉ። በተለምዶ የሚያለቅስ እንቁራሪት በመባል የሚታወቀው ትንሹ የውሃ እንቁራሪት (ፊሳላመስ ግራሲሊስ) የፀረ-ተባይ ብክለት ባዮይዳይተር ዝርያ እንደሆነ ታይቷል4,5,6,7,15. ዝርያው በቆመ ​​ውሃ ፣የተጠበቁ አካባቢዎች ወይም በአርጀንቲና ፣ኡራጓይ ፣ፓራጓይ እና ብራዚል 1617 በተለዋዋጭ መኖሪያ ውስጥ የሚገኝ ሲሆን በ IUCN ምደባ የተረጋጋ ነው ተብሎ የሚታሰበው ሰፊ ስርጭት እና የተለያዩ መኖሪያ ቤቶችን በመቻቻል18 ነው።
ለሳይፐርሜትሪን ከተጋለጡ በኋላ በአምፊቢያን ላይ ከፍተኛ ተጽእኖዎች ተዘግበዋል, በ tadpoles23,24,25 ላይ የባህሪ, morphological እና ባዮኬሚካላዊ ለውጦች, የተለወጡ የሟችነት እና የሜታሞሮሲስ ጊዜ, የኢንዛይም ለውጦች, የመፈልፈያ ስኬት መቀነስ24,25, hyperactivity26, የ cholinesterase እንቅስቃሴን መከልከል27 እና 2 የአፈፃፀም ለውጦች, የዋና አፈፃፀም ለውጦች. ይሁን እንጂ በአምፊቢያን ውስጥ የሳይፐርሜትሪን የጂኖቶክሲካል ተጽእኖ ጥናቶች ውስን ናቸው. ስለዚህ የአኑራን ዝርያዎች ለሳይፐርሜትሪን ተጋላጭነት መገምገም አስፈላጊ ነው.
የአካባቢ ብክለት በአምፊቢያን መደበኛ እድገትና እድገት ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል፣ ነገር ግን በጣም አስከፊው አሉታዊ ተፅዕኖ በፀረ-ተባይ መጋለጥ ምክንያት በዲኤንኤ ላይ የሚደርሰው የዘረመል ጉዳት ነው። የደም ሕዋስ ሞርፎሎጂ ትንተና የአንድን ንጥረ ነገር ብክለት እና ለዱር ዝርያዎች ሊመረዝ የሚችል ጠቃሚ ባዮ ጠቋሚ ነው29. የማይክሮኑክሊየስ ፍተሻ በአካባቢ ውስጥ ያሉትን ኬሚካሎች ጂኖቶክሲክሽን ለመወሰን በብዛት ከሚጠቀሙባቸው ዘዴዎች ውስጥ አንዱ ነው30. እንደ አምፊቢያን 31,32 ላሉ ፍጥረታት ኬሚካላዊ ብክለት ጥሩ አመላካች እና ለጂኖቶክሲክ ብክለት መጋለጥ መረጃን የሚሰጥ ፈጣን፣ ውጤታማ እና ርካሽ ዘዴ ነው።
የዚህ ጥናት አላማ የማይክሮኑክሊየስ ፈተናን እና የስነምህዳር ስጋት ዳሰሳን በመጠቀም የንግድ የሳይፐርሜትሪን ቀመሮችን ወደ ትናንሽ የውሃ ውስጥ ታድፖሎች ያለውን መርዛማ አቅም መገምገም ነው።
በፈተናው አጣዳፊ ጊዜ ውስጥ ለተለያዩ የንግድ ሳይፐርሜትሪን ክምችት የተጋለጡ የፒ.ግራሲሊስ ታድፖሎች ድምር ሞት (%)።
የ P. gracilis tadpoles ድምር ሞት (%) ለተለያዩ የንግድ ሳይፐርሜትሪን ክምችት በከባድ ምርመራ ወቅት የተጋለጡ።
የሚታየው ከፍተኛ ሞት በአምፊቢያን ውስጥ በተለያዩ የሳይፐርሜትሪን (6 እና 20 μg/L) ንፅፅር የተጋለጠ የጂኖቶክሲካል ተጽእኖ ውጤት ሲሆን ይህም በማይክሮኑክሊየል (ኤምኤን) እና በኤrythrocytes ውስጥ የኑክሌር መዛባት መኖሩን ያሳያል። የኤምኤን ምስረታ በ mitosis ውስጥ ስህተቶችን ያሳያል እና ከክሮሞሶምች ከማይክሮ ቱቡል ጋር ደካማ ትስስር ፣ ለክሮሞሶም መውሰድ እና መጓጓዣ ተጠያቂ የሆኑ የፕሮቲን ውህዶች ጉድለቶች ፣ የክሮሞሶም መለያየት ስህተቶች እና በዲ ኤን ኤ መበላሸት ጥገና38,39 ስህተቶች እና ከፀረ-ተባይ-ከተፈጠረው ኦክሳይድ ውጥረት40,41 ጋር የተያያዘ ነው። በሁሉም የተገመገሙ ስብስቦች ላይ ሌሎች ያልተለመዱ ነገሮች ተስተውለዋል. የሳይፐርሜትሪን ክምችት መጨመር በ erythrocytes ውስጥ የኑክሌር መዛባትን በ 5% እና በ 20% በትንሹ (1 μg/L) እና ከፍተኛ (20 μg/L) መጠን ጨምሯል። ለምሳሌ የዝርያ ዲ ኤን ኤ ለውጦች ለአጭርም ሆነ ለረጂም ጊዜ ህልውና ከባድ መዘዝ ሊያስከትሉ ይችላሉ፣ በዚህም የህዝብ ቁጥር መቀነስ፣ የስነ ተዋልዶ ብቃትን መቀየር፣ ዝርያን ማዳቀል፣ የዘረመል ልዩነት ማጣት እና የፍልሰት መጠን መቀየር። እነዚህ ሁሉ ምክንያቶች የዝርያዎችን ሕልውና እና ጥገና ላይ ተጽእኖ ሊያሳድሩ ይችላሉ42,43. የ erythroid እክሎች መፈጠር በሳይቶኪንሲስ ውስጥ ያለውን እገዳ ሊያመለክት ይችላል, በዚህም ምክንያት ያልተለመደው የሕዋስ ክፍፍል (ቢንዩክለድ ኤሪትሮክሳይት) 44,45; Multilobed nuclei የኑክሌር ሽፋን ብዙ ሎብስ46 ያላቸው ሲሆን ሌሎች የኤሪትሮይድ እክሎች ከዲኤንኤ ማጉላት ጋር ሊገናኙ ይችላሉ ለምሳሌ ኒውክሌር ኩላሊት/blebs47። የ anucleated erythrocytes መገኘት የተዳከመ የኦክስጂን ትራንስፖርት በተለይም በተበከለ ውሃ ውስጥ 48,49 ሊያመለክት ይችላል. አፖፕቶሲስ የሕዋስ ሞትን ያሳያል50.
ሌሎች ጥናቶች ደግሞ የሳይፐርሜትሪን የጂኖቶክሲካል ተጽእኖ አሳይተዋል። ካባና እና አል.51 ለ 96 ሰአታት ከፍተኛ መጠን ያለው ሳይፐርሜትሪን (5000 እና 10,000 μg L-1) ከተጋለጡ በኋላ በኦዶንቶፍሪነስ አሜሪካን ሴል ውስጥ ያሉ ማይክሮኒዩሊየይ እና የኑክሌር ለውጦችን ለምሳሌ የቢንኩላት ሴሎች እና አፖፖቲክ ሴሎች መኖራቸውን አሳይቷል። በሳይፐርሜትሪን የተፈጠረ አፖፕቶሲስ በ P. biligonigerus52 እና Rhinella arenarum53 ውስጥም ተገኝቷል። እነዚህ ውጤቶች እንደሚያሳዩት ሳይፐርሜትሪን በተለያዩ የውኃ ውስጥ ፍጥረታት ላይ የጂኖቶክሲካል ተጽእኖ እንዳለው እና የኤምኤን እና የኢኤንኤ ምርመራ በአምፊቢያን ላይ የንዑስ ገዳይ ተጽእኖ አመላካች ሊሆን እንደሚችል እና ለአካባቢው ዝርያዎች እና ለአደገኛ ንጥረ ነገሮች የተጋለጡ የዱር ህዝቦች ላይ ተፈፃሚ ሊሆን እንደሚችል ይጠቁማሉ12.
የሳይፐርሜትሪን የንግድ ፎርሙላዎች ከፍተኛ የአካባቢ አደጋ (አጣዳፊ እና ሥር የሰደደ) ናቸው፣ ዋና መሥሪያ ቤቶች ከዩኤስ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ (EPA) ደረጃ 54 የሚበልጡ ሲሆን ይህም ዝርያው በአከባቢው ውስጥ ካለ አሉታዊ ተጽዕኖ ሊያሳድር ይችላል። ሥር በሰደደው የአደጋ ግምገማ፣ NOEC ለሟችነት 3 μg L-1 ነበር፣ ይህም በውሃ ውስጥ የሚገኙት ውህዶች በእንስሳቱ ላይ አደጋ ሊያስከትሉ እንደሚችሉ ያረጋግጣል። ለኤንዶሱልፋን እና ለሳይፐርሜትሪን ድብልቅ የተጋለጡ ገዳይ NOEC ከ 168 ሰአታት በኋላ 500 μg L-1; ይህ ዋጋ ከ336 ሰአታት በኋላ ወደ 0.0005 μg L-1 ቀንሷል። ደራሲዎቹ እንደሚያሳዩት ተጋላጭነቱ ረዘም ላለ ጊዜ ለዝርያዎቹ ጎጂ የሆኑትን ስብስቦች ይቀንሳል. በተጨማሪም የ NOEC እሴቶች ከ P. gracilis በተመሳሳይ ጊዜ በተጋለጡበት ወቅት ከፍ ያለ እንደነበሩ ማጉላት አስፈላጊ ነው, ይህም ለሳይፐርሜትሪን የዝርያ ምላሽ ዝርያ-ተኮር መሆኑን ያሳያል. በተጨማሪም በሟችነት ደረጃ፣ ለሳይፐርሜትሪን ከተጋለጡ በኋላ የ CHQ ዋጋ P. gracilis 64.67 ደርሷል፣ ይህም በአሜሪካ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ 54 ከተቀመጠው የማመሳከሪያ ዋጋ ከፍ ያለ ነው። በርካታ የአምፊቢያን ዝርያዎች. ፒ. ግራሲሊስ ሜታሞርፎሲስን ለመጨረስ በግምት 30 ቀናትን እንደሚወስድ ግምት ውስጥ በማስገባት የተጠና የሳይፐርሜትሪን ክምችት በበሽታ የተያዙ ሰዎች ገና በለጋ እድሜያቸው ወደ አዋቂ ወይም የመራቢያ ደረጃ እንዳይገቡ በመከላከል ለሕዝብ ቁጥር መቀነስ አስተዋጽኦ ሊያደርጉ ይችላሉ ብሎ መደምደም ይቻላል።
በማይክሮኒዩሊዩ እና በሌሎች የኤርትሮሳይት ኑክሌር እክሎች ላይ በተሰየመው የአደጋ ግምገማ የ CHQ እሴቶች ከ14.92 እስከ 97.00 ሲደርሱ ሳይፐርሜትሪን በተፈጥሮ መኖሪያው ውስጥ እንኳን ለ P. gracilis ሊያጋልጥ የሚችል የጂኖቶክሲካል አደጋ እንዳለው ያሳያል። የሟችነትን ሁኔታ ግምት ውስጥ በማስገባት ለ P. gracilis የሚቋቋሙት የ xenobiotic ውህዶች ከፍተኛ መጠን 4.24 μg L-1 ነበር. ነገር ግን፣ እስከ 1 μg/L ዝቅተኛ የሆኑ ውህዶች የጂኖቶክሲክ ውጤቶችም አሳይተዋል። ይህ እውነታ ያልተለመዱ ግለሰቦች ቁጥር እንዲጨምር ሊያደርግ ይችላል57 እና በመኖሪያቸው ውስጥ የዝርያዎችን እድገት እና መራባት ላይ ተጽእኖ ያሳድራል, ይህም የአምፊቢያን ህዝብ ቁጥር ይቀንሳል.
የሳይፐርሜትሪን ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች የንግድ ቀመሮች ለ P. gracilis ከፍተኛ አጣዳፊ እና ሥር የሰደደ መርዛማነት አሳይተዋል. ከፍ ያለ የሞት መጠን ተስተውሏል, በመርዛማ ተፅእኖዎች ምክንያት, በማይክሮኒዩሊዩስ እና በኤርትሮክሳይት ኑክሌር እክሎች በተለይም የሴሬድ ኒውክሊየስ, የሎብድ ኒውክሊየስ እና የቬሲኩላር ኒዩክሊየሎች መኖራቸውን ያሳያል. በተጨማሪም, የተጠኑት ዝርያዎች አስከፊ እና ሥር የሰደደ የአካባቢ አደጋዎችን ይጨምራሉ. እነዚህ መረጃዎች፣ በምርምር ቡድናችን ከቀደምት ጥናቶች ጋር ተዳምረው፣ የተለያዩ የሳይፐርሜትሪን የንግድ ቀመሮች እንኳን አሁንም acetylcholinesterase (AChE) እና butyrylcholinesterase (BChE) እንቅስቃሴዎች እና oxidative stress58 ቀንሷል፣ እና P. gracilis ውስጥ የአፍ መታወክ ላይ ለውጥ አስከትሏል, ይህ የንግድ እና ፎርሙላዎች letoksycheskoe ከፍተኛ ይዘት ያለው መሆኑን ያሳያል. ዝርያዎች. ሃርትማን እና ሌሎች. 60 የሳይፐርሜትሪን የንግድ ፎርሙላዎች ለፒ.ግራሲሊስ እና ለሌላ ተመሳሳይ ዝርያ (P. cuvieri) ከሌሎች ዘጠኝ ፀረ ተባይ መድኃኒቶች ጋር ሲነፃፀሩ በጣም መርዛማ መሆናቸውን አረጋግጧል። ይህ የሚያሳየው በህጋዊ መንገድ የፀደቀው የሳይፐርሜትሪን ክምችት ለአካባቢ ጥበቃ ከፍተኛ ሞት እና የረዥም ጊዜ የህዝብ ቁጥር መቀነስ ሊያስከትል ይችላል።
በአካባቢው ውስጥ የሚገኙት ስብስቦች ከፍተኛ ሞት ሊያስከትሉ ስለሚችሉ እና ለ P. gracilis አደጋ ሊያስከትሉ ስለሚችሉ የተባይ ማጥፊያውን መርዛማነት ለመገምገም ተጨማሪ ጥናቶች ያስፈልጋሉ. በእነዚህ ፍጥረታት ላይ በተለይም በብራዚል ዝርያዎች ላይ ያለው መረጃ በጣም አነስተኛ ስለሆነ በአምፊቢያን ዝርያዎች ላይ የተደረገ ጥናት ሊበረታታ ይገባል።
ሥር የሰደደ የመርዛማነት ፈተና ለ 168 ሰአታት (7 ቀናት) በስታቲስቲክስ ሁኔታዎች እና ጥቃቅን ጥራቶች: 1, 3, 6 እና 20 μg ai L-1. በሁለቱም ሙከራዎች በአንድ የሕክምና ቡድን ውስጥ 10 ታድፖሎች በስድስት ድግግሞሽ የተገመገሙ ሲሆን ይህም በአንድ ትኩረት በአጠቃላይ 60 tadpoles. ይህ በእንዲህ እንዳለ የውሃ-ብቻ ሕክምና እንደ አሉታዊ ቁጥጥር ሆኖ አገልግሏል. እያንዳንዱ የሙከራ ማዋቀር 500 ሚሊ ሊትር እና 1 tadpole በ 50 ሚሊ ሊትር የመፍትሄው መጠን ያለው የጸዳ የመስታወት ሳህን ያካትታል። ማሰሮው እንዳይተን ለመከላከል በፕላስቲክ (polyethylene) ፊልም ተሸፍኗል እና ያለማቋረጥ አየር ይለቀቃል።
በ 0, 96 እና 168 ሰአታት ውስጥ ፀረ-ተባይ መድሃኒቶችን ለመወሰን ውሃው በኬሚካል ተንትኗል. እንደ ሳቢን እና ሌሎች. 68 እና ማርቲንስ እና ሌሎች. 69, ትንታኔዎቹ የተካሄዱት በሳንታ ማሪያ ፌዴራላዊ ዩኒቨርሲቲ ፀረ-ተባይ ትንታኔ ላብራቶሪ (LARP) የጋዝ ክሮማቶግራፊን በመጠቀም በሶስት እጥፍ ባለ አራት እጥፍ የጅምላ ስፔክትሮሜትሪ (Varian model 1200, Palo Alto, California, USA) በመጠቀም ነው. በውሃ ውስጥ ያሉትን ፀረ-ተባይ መድሃኒቶች በቁጥር መወሰን እንደ ተጨማሪ ቁሳቁስ (ሠንጠረዥ SM1) ይታያል.
ለማይክሮኑክሊየስ ፈተና (ኤምኤንቲ) እና የቀይ ሕዋስ የኑክሌር መዛባት ፈተና (አር ኤን ኤ) ከእያንዳንዱ የሕክምና ቡድን 15 ታድፖሎች ተተነዋል። Tadpoles በ 5% lidocaine (50 mg g-170) ደንዝዘዋል እና የደም ናሙናዎች የሚጣሉ ሄፓሪንይዝድ መርፌዎችን በመጠቀም በልብ ንክኪ ተሰብስበዋል ። የደም ስሚር በማይክሮስኮፕ ስላይዶች ላይ ተዘጋጅቷል፣ አየር ደርቋል፣ በ100% ሜታኖል (4 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ) ለ2 ደቂቃ ተስተካክሎ፣ ከዚያም በ10% Giemsa መፍትሄ ለ15 ደቂቃ በጨለማ ውስጥ ተበክሏል። በሂደቱ መጨረሻ ላይ ከመጠን በላይ ቆሻሻን ለማስወገድ ተንሸራታቾች በንፋስ ውሃ ታጥበው በክፍል ሙቀት ውስጥ ደርቀዋል.
ከእያንዳንዱ tadpole ቢያንስ 1000 RBC 100× ማይክሮስኮፕ በመጠቀም 71 ዓላማ ያለው ኤምኤን እና ኢኤንኤ መኖሩን ለማወቅ ተችሏል። በጠቅላላው 75,796 RBCs ከ tadpoles የተገመገመ የሳይፐርሜትሪን ክምችት እና መቆጣጠሪያዎችን ግምት ውስጥ በማስገባት ነው. በካራስኮ እና ሌሎች ዘዴ መሠረት Genotoxicity ተንትኗል። እና Fenech et al.38,72 የሚከተሉትን የኑክሌር ጉዳቶች ድግግሞሽ በመወሰን: (1) anucleate ሕዋሳት: ኒውክላይ ያለ ሕዋሳት; (2) አፖፖቲክ ሴሎች፡- የኑክሌር መበታተን፣ ፕሮግራም የተደረገ የሕዋስ ሞት; (3) የቢንኩላት ሴሎች: ሁለት ኒውክሊየስ ያላቸው ሴሎች; (4) የኑክሌር ቡቃያዎች ወይም ብሌብ ሕዋሶች፡- የኑክሌር ሽፋን ትናንሽ ፕሮቲኖች ያላቸው ኒውክሊየስ ያላቸው ሴሎች፣ ከማይክሮኑክሊይ ጋር የሚመሳሰሉ እብጠቶች; (5) ካሪዮላይዝድ ሴሎች፡ ውስጣዊ ቁሳቁስ የሌላቸው የኒውክሊየስ ገጽታ ብቻ ያላቸው ሴሎች; (6) የተስተካከሉ ህዋሶች፡- ግልጽ የሆኑ ስንጥቆች ወይም ቅርፆች ያላቸው ኒውክሊየስ ያላቸው ሴሎች፣ እንዲሁም የኩላሊት ቅርጽ ያላቸው ኒውክሊየስ ይባላሉ። (7) lobulated ሕዋሳት: ከላይ ከተጠቀሱት vesicles በላይ የኑክሌር protrusions ጋር ሕዋሳት; እና (8) ማይክሮሴሎች፡- የታመቁ ኒውክሊየስ እና የተቀነሰ ሳይቶፕላዝም ያላቸው ሴሎች። ለውጦቹ ከአሉታዊ ቁጥጥር ውጤቶች ጋር ተነጻጽረዋል.
የአጣዳፊ የመርዛማነት ምርመራ ውጤቶች (LC50) የተተነተነው GBasic ሶፍትዌር እና የ TSK-Trimmed Spearman-Karber method74ን በመጠቀም ነው። የረዥም ጊዜ የፈተና መረጃ ለስህተት መደበኛነት (ሻፒሮ-ዊልስ) እና የልዩነት ግብረ-ሰዶማዊነት (ባርትሌት) አስቀድሞ ተፈትኗል። ውጤቶቹ የተተነተኑት የአንድ-መንገድ ልዩነት (ANOVA) በመጠቀም ነው። የቱኪ ምርመራ በራሳቸው መካከል መረጃን ለማነፃፀር ጥቅም ላይ የዋለ ሲሆን የዱኔት ፈተና በሕክምና ቡድን እና በአሉታዊ ቁጥጥር ቡድን መካከል ያለውን መረጃ ለማነፃፀር ጥቅም ላይ ውሏል ።
የ LOEC እና NOEC ውሂብ የተተነተነው የዱኔት ፈተናን በመጠቀም ነው። የስታቲስቲክስ ሙከራዎች የተካሄዱት በስታቲስቲክስ 8.0 ሶፍትዌር (ስታትሶፍት) በ95% ትርጉም ደረጃ (p <0.05) በመጠቀም ነው።