ፎስፎሪሌሽን ዋናውን የእድገት ተቆጣጣሪ ዴላ ያነቃቃል፣ ሂስቶን ኤች2ኤ በአረብዲፖሲስ ውስጥ ካለው ክሮማቲን ጋር እንዲጣበቅ ያበረታታል።

የዴላ ፕሮቲኖች ተጠብቀው ይገኛሉየእድገት ተቆጣጣሪዎችለውስጣዊ እና ውጫዊ ምልክቶች ምላሽ በመስጠት በእፅዋት ልማት ውስጥ ማዕከላዊ ሚና ይጫወታሉ። እንደ ትራንስክሪፕሽን ተቆጣጣሪዎች፣ DELLAዎች ከትራንስክሪፕሽን ፋክተሮች (TFs) እና ከሂስቶን H2A ጋር በGRAS ጎራዎቻቸው በኩል ይያያዛሉ እና በአስተዋዋቂዎች ላይ እርምጃ እንዲወስዱ ይመለመላሉ። የቅርብ ጊዜ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የዴላ መረጋጋት ከትርጉም በኋላ በሁለት ዘዴዎች ቁጥጥር ይደረግበታል፡- በእፅዋት ሆርሞን የሚመጣ ፖሊዩቢኩዊቲንጊብሬሊንይህም ወደ ፈጣን መበላሸታቸው እና ከትንሽ ኡቢኩዊቲን-መሰል ሞዲፋየር (SUMO) ጋር መዋሃድን ያስከትላል፣ ይህም ክምችታቸውን ይጨምራል። ከዚህም በላይ የዴላ እንቅስቃሴ በሁለት የተለያዩ የግሉኮሲሌሽን ዘዴዎች በተለዋዋጭነት ይቆጣጠራል፡ O-fucosylation የዴላ-TF መስተጋብርን ያሻሽላል፣ O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ማሻሻያ የዴላ-TF መስተጋብርን ይከለክላል። ሆኖም፣ የዴላ ፎስፈረስሌሽን ሚና ግልጽ አይደለም ምክንያቱም ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች እርስ በርስ የሚጋጩ ውጤቶችን አሳይተዋል፣ አንዳንዶች ፎስፈረስሌሽን የዴላ መበላሸትን እንደሚያበረታታ ወይም እንደሚገታ ሲጠቁሙ ሌሎች ደግሞ ፎስፈረስሌሽን መረጋጋትን እንደማይጎዳ ይጠቁማሉ። እዚህ፣ በGA1-3 repressor (RGA)፣ AtDELLA፣ በጅምላ ስፔክትሮሜትሪ ከዓረብዲፖሲስ ታሊያና የተጸዳውን የፎስፈረስሌሽን ቦታዎችን እንለያለን እና በፖሊኤስ እና ፖሊኤስ/ቲ ክልሎች ውስጥ ያሉ ሁለት RGA ፔፕታይዶች ፎስፈረስሌሽን የH2A ትስስርን እና ከዒላማ አራማጆች ጋር የRGA ግንኙነትን በማስተዋወቅ የRGA እንቅስቃሴን እንደሚያሻሽል ያሳያል። በተለይም፣ ፎስፈረስሌሽን የRGA-TF ግንኙነቶችን ወይም የRGA መረጋጋትን አልነካም። ጥናታችን ፎስፈረስሌሽን የዴላ እንቅስቃሴን የሚያነሳሳበትን ሞለኪውላዊ ዘዴ ያሳያል።
የኛ የጅምላ ስፔክትሮሜትሪክ ትንተና እንደሚያሳየው ፔፕ1 እና ፔፕ2 በGA ጉድለት ባለው የGa1 ዳራ ውስጥ በRGA ውስጥ በከፍተኛ ሁኔታ ፎስፈረስ እንደተደረገባቸው አሳይቷል። ከዚህ ጥናት በተጨማሪ የፎስፎፕሮቲዮሚክ ጥናቶች በRGA ውስጥ የፔፕ1 ፎስፈረስሌሽን አሳይተዋል፣ ምንም እንኳን ሚናው እስካሁን ባይጠናም53,54,55። በተቃራኒው፣ ይህ ፔፕታይድ ሊታወቅ የሚችለው በRGAGKG ትራንስጂን ብቻ ስለሆነ የፔፕ2 ፎስፈረስሌሽን ከዚህ በፊት አልተገለጸም። የፔፕ1 ፎስፈረስሌሽንን ያስወገደው m1A ሚውቴሽን በፕላንታ ውስጥ የRGA እንቅስቃሴን በትንሹ ቢቀንስም፣ ከ m2A ጋር ሲጣመር የRGA እንቅስቃሴን በመቀነስ ላይ ተጨማሪ ውጤት ነበረው (ተጨማሪ ምስል 6)። በአስፈላጊ ሁኔታ፣ የፔፕ1 ፎስፈረስሌሽን በGA በተሻሻለው sly1 ሚውቴሽን ውስጥ ከga1 ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ ይህም GA የRGA ዲፎስፈረስሌሽንን እንደሚያበረታታ እና እንቅስቃሴውን እንደሚቀንስ ይጠቁማል። GA የRGA ፎስፈረስሌሽንን የሚያጨናንቅበት ዘዴ ተጨማሪ ምርመራ ይፈልጋል። አንድ አማራጭ ይህ የሚሆነው ያልታወቀ የፕሮቲን ኪናሴን በመቆጣጠር ነው። ምንም እንኳን ጥናቶች የ CK1 ፕሮቲን ኪናሴ EL1 አገላለጽ በሩዝ41 ​​ውስጥ በGA ቁጥጥር ስር መሆኑን ቢያሳዩም፣ ውጤቶቻችን እንደሚያሳዩት የአረብቢዶፕሲስ EL1 ሆሞሎግ (AEL1-4) ከፍተኛ ደረጃ ያላቸው ሚውቴሽኖች የ RGA ፎስፈረስሌሽንን አይቀንሱም። ከውጤቶቻችን ጋር በሚስማማ መልኩ፣ በቅርቡ የአረብቢዶፕሲስ AEL ከመጠን በላይ የሚገልጹ መስመሮችን እና የኤኤል ሶስት እጥፍ ሚውቴሽንን በመጠቀም የተደረገ የፎስፎፕሮቲዮሚክ ጥናት የእነዚህ ኪናሴዎች 56 ንዑስ ክፍሎች የዴላ ፕሮቲኖችን አላሳየም። የእጅ ጽሑፉን ስናዘጋጅ፣ በስንዴ ውስጥ GSK3/SHAGY-like kinase (ትሪቲኩም አኢስቲቪም) የሚይዘው ጂን GSK3 DELLA (Rht-B1b)57 ፎስፈረስ እንደሚችል ተዘግቧል፣ ምንም እንኳን የRht-B1b ፎስፈረስሌሽን በፕላንታ ውስጥ ባይረጋገጥም። በጂኤስኬ3 ፊት በብልቃጥ ውስጥ የኢንዛይም ምላሾች እና የጅምላ ስፔክትሮሜትሪ ትንተና ተከትሎ በዲኤልኤ እና ግራስ የRht-B1b ጎራዎች መካከል የሚገኙ ሶስት የፎስፈረስሌሽን ቦታዎችን አሳይቷል (ተጨማሪ ምስል 3)። በሦስቱም የፎስፈረስሌሽን ቦታዎች ላይ የሴሪን ወደ አላኒን መተካት በትራንስጀኒክ ስንዴ ውስጥ የRht-B1b እንቅስቃሴን ቀንሷል፣ ይህም በፔፕ2 RGA ውስጥ የአላኒን ምትክ የRGA እንቅስቃሴን ቀንሷል ከሚለው ግኝታችን ጋር በሚስማማ መልኩ ነው። ሆኖም፣ በብልቃጥ ውስጥ የፕሮቲን መበላሸት ምርመራዎች ፎስፈረስሌሽን Rht-B1b57ንም ማረጋጋት እንደሚችል በተጨማሪ አሳይተዋል። ይህ በፔፕ2 RGA ውስጥ የአላኒን ምትክ በእፅዋት ውስጥ ያለውን መረጋጋት እንደማይለውጠው ከሚያሳዩት ውጤቶቻችን በተቃራኒ ነው። በስንዴ ውስጥ ያለው GSK3 በአራቢዶፕሲስ 57 ውስጥ የብራሲኖስቴሮይድ-ስሜታዊ ያልሆነ ፕሮቲን 2 (BIN2) ኦርቶሎጂ ነው። BIN2 የBR ምልክት አሉታዊ ተቆጣጣሪ ሲሆን BR የምልክት መንገዱን የሚያንቀሳቅሰው የBIN2 መበላሸት 58ን በማስከተል ነው። የBR ሕክምና በአራቢዶፕሲስ ውስጥ የRGA መረጋጋት 59 ወይም የፎስፈረስሌሽን መጠንን እንደማይቀንስ አሳይተናል (ተጨማሪ ምስል 2)፣ ይህም RGA በBIN2 ፎስፈረስሌሽን የመሆን ዕድሉ አነስተኛ መሆኑን ይጠቁማል።
ሁሉም የቁጥር መረጃዎች በኤክሴል (Excel) በመጠቀም በስታቲስቲክስ የተተነተኑ ሲሆን ጉልህ ልዩነቶችም የተማሪውን ቲ-ሙከራ በመጠቀም ተወስነዋል። የናሙና መጠንን አስቀድሞ ለመወሰን ምንም የስታቲስቲክስ ዘዴዎች ጥቅም ላይ አልዋሉም። ከትንታኔው ውስጥ ምንም መረጃ አልተገለለም፤ ሙከራው በዘፈቀደ አልተደረገም፤ ተመራማሪዎቹም በሙከራው እና በውጤት ግምገማው ወቅት ስለ ምደባው ያውቁ ነበር። የናሙና መጠኖች በምስል አፈ ታሪኮች እና በጥሬው የውሂብ ፋይሎች ውስጥ ቀርበዋል።