ዴላ ፕሮቲኖች ተጠብቀዋል።የእድገት ተቆጣጣሪዎችለውስጣዊ እና ውጫዊ ምልክቶች ምላሽ ለመስጠት በእፅዋት እድገት ውስጥ ማዕከላዊ ሚና የሚጫወቱ። እንደ ግልባጭ ተቆጣጣሪዎች፣ DELLAዎች ወደ ግልባጭ ሁኔታዎች (TFs) እና histone H2A በGRAS ጎራዎቻቸው በኩል ይተሳሰራሉ እና በአስተዋዋቂዎች ላይ እንዲሰሩ ይመለመላሉ። በቅርብ ጊዜ የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የዲኤልኤ መረጋጋት ከትርጉም በኋላ በሁለት ስልቶች ቁጥጥር የሚደረግበት ነው-በእፅዋት ሆርሞን የሚመነጨው ፖሊዩቢኩቲኔሽንጊብሬሊን, ይህም ወደ ፈጣን ማሽቆልቆል ያመራል, እና ከትንሽ ubiquitin-like modifier (SUMO) ጋር መቀላቀል, ይህም ክምችታቸውን ይጨምራል. ከዚህም በላይ የዲኤልኤ እንቅስቃሴ በተለዋዋጭ ሁኔታ የሚቆጣጠረው በሁለት የተለያዩ ግላይኮሲሌሽን ስልቶች ነው፡ O-fucosylation የDELLA-TF መስተጋብርን ያሻሽላል፣ O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ማሻሻያ ግን የDELLA-TF መስተጋብርን ይከለክላል። ይሁን እንጂ ቀደም ባሉት ጥናቶች እርስ በርሱ የሚጋጩ ውጤቶችን በማሳየታቸው የዲኤልኤ ፎስፈረስላይዜሽን ሚና ግልጽ አይደለም፣ አንዳንዶች ፎስፈረስላይዜሽን የዲኤልኤ መበላሸትን እንደሚያበረታታ ወይም እንደሚገታ እና ሌሎች ደግሞ ፎስፈረስ አረጋጋጭነታቸውን እንደማይጎዳ ይጠቁማሉ። እዚህ፣ በ GA1-3 ሪፕሬሰር (RGA)፣ AtDELLA፣ ከአረቢዶፕሲስ ታሊያና በጅምላ ስፔክትሮሜትሪ የተጣራ የphosphorylation ጣቢያዎችን ለይተናል እና በፖሊኤስ እና ፖሊኤስ/ቲ ክልሎች ውስጥ ሁለት RGA peptides phosphorylation H2A bonding እና RGA ን ከአላማ አድራጊዎች ጋር በማስተዋወቅ የ RGA እንቅስቃሴን እንደሚያሳድግ ያሳያል። በተለይም፣ ፎስፈረስላይዜሽን የRGA-TF መስተጋብርን ወይም የ RGA መረጋጋትን አልነካም። ጥናታችን ፎስፈረስላይዜሽን የዲኤልኤ እንቅስቃሴን የሚያነሳሳበትን ሞለኪውላዊ ዘዴ ያሳያል።
የእኛ የጅምላ ስፔክትሮሜትሪክ ትንታኔ ሁለቱም Pep1 እና Pep2 በ RGA ውስጥ በ GA-deficient Ga1 ዳራ ውስጥ በጣም ፎስፈረስ እንደነበሩ አረጋግጧል። ከዚህ ጥናት በተጨማሪ የፎስፎፕሮቴኦሚክ ጥናቶች ፔፕ1 ፎስፈረስላይዜሽን በ RGA ውስጥ አሳይተዋል፣ ምንም እንኳን ሚናው እስካሁን ያልተጠና ቢሆንም 53,54,55። በአንጻሩ፣ ይህ peptide የ RGAGKG ትራንስጂን በመጠቀም ብቻ ሊገኝ ስለሚችል Pep2 phosphorylation ከዚህ ቀደም አልተገለጸም። የፔፕ1 ፎስፈረስላይሽንን ያስወገደው m1A ሚውቴሽን በፕላንታ ውስጥ የ RGA እንቅስቃሴን በትንሹ የቀነሰ ቢሆንም፣ ከ m2A ጋር ሲደባለቅ የ RGA እንቅስቃሴን በመቀነስ ተጨማሪ ውጤት ነበረው (ተጨማሪ ምስል 6)። በአስፈላጊ ሁኔታ, Pep1 phosphorylation GA-የተሻሻለ sly1 mutant ውስጥ ga1 ጋር ሲነጻጸር በእጅጉ ቀንሷል, GA RGA dephosphorylation የሚያበረታታ መሆኑን ይጠቁማል, እንቅስቃሴ ይቀንሳል. GA RGA phosphorylationን የሚያጠፋበት ዘዴ ተጨማሪ ምርመራ ያስፈልገዋል። አንደኛው አማራጭ ይህ ሊገኝ የሚችለው ባልታወቀ የፕሮቲን ኪናሴ ቁጥጥር ነው። ጥናቶች እንደሚያሳዩት የ CK1 ፕሮቲን kinase EL1 አገላለጽ በ GA በሩዝ 41 ቀንሷል፣ ውጤታችን እንደሚያመለክተው በአረብኛ EL1 homologue (AEL1-4) ከፍተኛ ደረጃ ያለው ሚውቴሽን RGA phosphorylation አይቀንስም። ከውጤታችን ጋር በመስማማት፣ አረብቢዶፕሲስ AEL ከመጠን በላይ የመጨመሪያ መስመሮችን እና ael triple mutant በመጠቀም በቅርቡ የተደረገ የphosphoproteomic ጥናት የትኛውንም የ DELLA ፕሮቲኖች የእነዚህ kinases ንኡስ አካል እንደሆኑ አልገለጸም። የብራናውን ጽሑፍ ስናዘጋጅ GSK3፣ GSK3/SHAGGY-like kinase በስንዴ (Triticum aestivum) ውስጥ ያለው ጂን ፎስፈረስ DELLA (Rht-B1b)57 ሊፈጥር እንደሚችል ተነግሯል። በ GSK3 ፊት በብልቃጥ ኢንዛይም ምላሾች ከዚያም የጅምላ ስፔክትሮሜትሪ ትንታኔ በ DELLA እና GRAS መካከል በ Rht-B1b (ተጨማሪ ምስል 3) መካከል የሚገኙትን ሶስት የፎስፈረስላይዜሽን ቦታዎችን አሳይቷል። በፔፕ2 አርጂኤ ውስጥ የአላንኒን መተካት የ RGA እንቅስቃሴን እንደሚቀንስ ባደረግነው ግኝታችን መሠረት በሦስቱም የፎስፈረስ መለዋወጫ ጣቢያዎች ከሴሪን ወደ አላኒን በመተካት በትራንስጀኒክ ስንዴ ውስጥ የRht-B1b እንቅስቃሴ ቀንሷል። ነገር ግን፣ በብልቃጥ ፕሮቲን መበላሸት ላይ የተደረጉ ጥናቶች ፎስፈረስላይዜሽን Rht-B1b57 ን ማረጋጋት እንደሚችልም አሳይቷል። ይህ በፔፕ2 RGA ውስጥ የአላኒን መተካት በፕላንታ ውስጥ ያለውን መረጋጋት እንደማይለውጥ ከኛ ውጤቶች በተቃራኒ ነው። በስንዴ ውስጥ GSK3 የብራሲኖስቴሮይድ የማይነካ ፕሮቲን ኦርቶሎጅ ነው 2 (BIN2) በአረብኛ 57. BIN2 የBR ምልክት ማድረጊያ አሉታዊ ተቆጣጣሪ ነው፣ እና BR የ BIN2 ውድመትን በማስከተል የምልክት መንገዱን ያንቀሳቅሳል። በ BIN2 ፎስፈረስ የመጨመር እድሉ አነስተኛ ነው።
ሁሉም የቁጥር መረጃዎች ኤክሴልን በመጠቀም በስታቲስቲክስ የተተነተኑ ሲሆን ጉልህ ልዩነቶች የተማሪውን ቲ-ፈተና በመጠቀም ተወስነዋል። የናሙና መጠንን አስቀድሞ ለመወሰን ምንም ዓይነት የስታቲስቲክስ ዘዴዎች ጥቅም ላይ አልዋሉም. ከመተንተን ምንም ውሂብ አልተካተተም; ሙከራው በዘፈቀደ አልተደረገም; እና ተመራማሪዎቹ በሙከራው እና በውጤት ግምገማ ወቅት ምደባውን ያውቁ ነበር. የናሙና መጠኖች በምስሉ አፈ ታሪኮች እና በጥሬው የውሂብ ፋይሎች ውስጥ ቀርበዋል.
የልጥፍ ሰዓት፡- ኤፕሪል 15-2025