የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች እና የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች በሴንት ጆንስ ዎርት ውስጥ በብልቃጥ ኦርጋኖጄኔሲስ እና ባዮአክቲቭ ውህዶች ምርት ላይ ያላቸው የተመሳሳይ ተፅእኖ

በዚህ ጥናት ውስጥ፣ የተቀናጀ ሕክምና የማነቃቂያ ውጤቶችየእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች(2,4-D እና ኪኔቲን) እና የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች (Fe₃O₄-NPs) በብልቃጥ ሞርፎጄኔሲስ እና በ *Hypericum perforatum* L. ውስጥ ሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይት ምርት ላይ ተመርምረዋል። ​​የተሻሻለው ሕክምና [2,4-D (0.5 mg/L) + ኪኔቲን (2 mg/L) + Fe₃O₄-NPs (4 mg/L)] የእፅዋትን እድገት መለኪያዎች በእጅጉ አሻሽሏል፡ የእፅዋት ቁመት በ59.6% ጨምሯል፣ የስር ርዝመት በ114.0%፣ የቡድ ቁጥር በ180.0% እና የካለስ ትኩስ ክብደት ከቁጥጥር ቡድኑ ጋር ሲነጻጸር በ198.3% ጨምሯል። ይህ የተቀናጀ ሕክምና የእድሳት ቅልጥፍናን (50.85%) ጨምሯል እና የሃይፐርሲሲን ይዘትን በ66.6% ጨምሯል። የጂሲ-ኤምኤስ ትንተና ከፍተኛ የሃይፐርሮሳይድ፣ የቤታ-ፓቶሊን እና የሴቲል አልኮሆል ይዘት እንዳለው አሳይቷል፣ ይህም ከጠቅላላው የከፍተኛ ቦታ 93.36% ይይዛል፣ የጠቅላላው የፊኖሊክ እና የፍላቮኖይድ ይዘት ደግሞ እስከ 80.1% ጨምሯል። እነዚህ ውጤቶች የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች (PGRs) እና Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች (Fe₃O₄-NPs) ኦርጋኖጄኔሲስን በማነቃቃት እና የባዮአክቲቭ ውህዶችን በማከማቸት ተመሳሳይ ውጤት ያሳያሉ፣ ይህም የመድኃኒት ተክሎችን ባዮቴክኖሎጂያዊ ማሻሻያ ተስፋ ሰጪ ስትራቴጂን ይወክላል።
የቅዱስ ጆን ዎርት (ሃይፔሪኩም ፐርፎራተም ኤል.) እንዲሁም የቅዱስ ጆን ዎርት በመባል የሚታወቀው፣ የሃይፔሪካሴ ቤተሰብ አባል የሆነ ዘላቂ የእፅዋት ተክል ሲሆን ኢኮኖሚያዊ ጠቀሜታ አለው።[1] እምቅ ባዮአክቲቭ ክፍሎቹ ተፈጥሯዊ ታኒን፣ ዛንቶኖች፣ ፍሎሮግሉሲኖል፣ ናፍታሌኔዲያንትሮን (ሃይፔሪን እና ፕሴዱኦሃይፐርይን)፣ ፍላቮኖይድ፣ ፊኖሊክ አሲዶች እና አስፈላጊ ዘይቶችን ያካትታሉ።[2,3,4] የቅዱስ ጆን ዎርት በባህላዊ ዘዴዎች ሊሰራጭ ይችላል፤ ሆኖም ግን፣ የባህላዊ ዘዴዎች ወቅታዊነት፣ ዝቅተኛ የዘር ፍሬ ማብቀል እና ለበሽታዎች ተጋላጭነት ለትላልቅ እርሻዎች እና ለሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይቶች ቀጣይነት ያለው ምስረታ ያለውን አቅም ይገድባል።[1,5,6]
ስለዚህ፣ በብልቃጥ ውስጥ የቲሹ ባህል ፈጣን የእፅዋት ስርጭት፣ የጀርምፕላዝማ ሀብቶችን መጠበቅ እና የመድኃኒት ውህዶችን መጨመር ውጤታማ ዘዴ ተደርጎ ይቆጠራል [7፣ 8]። የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች (PGRs) ሞርፎጄኔሲስን በመቆጣጠር ረገድ ወሳኝ ሚና ይጫወታሉ እና ለካልስ እና ለሙሉ ህዋሳት በብልቃጥ ውስጥ ለማልማት አስፈላጊ ናቸው። የእነዚህን የእድገት ሂደቶች በተሳካ ሁኔታ ለማጠናቀቅ የእነሱን ክምችት እና ጥምረት ማመቻቸት ወሳኝ ነው [9]። ስለዚህ፣ የተቆጣጣሪዎችን ተገቢ ስብጥር እና ክምችት መረዳት የቅዱስ ጆንስ ዎርት (H. perforatum) እድገት እና የመልሶ ማቋቋም አቅም ለማሻሻል አስፈላጊ ነው [10]።
የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች (Fe₃O₄) ለቲሹ ባህል ሲዘጋጁ ወይም ሲገነቡ የቆዩ የናኖፓርቲክሎች ክፍል ናቸው። Fe₃O₄ ጉልህ የሆነ መግነጢሳዊ ባህሪያት፣ ጥሩ ባዮተኳሃኝነት እና የእፅዋትን እድገት የማሳደግ እና የአካባቢ ጭንቀትን የመቀነስ ችሎታ ስላለው በቲሹ ባህል ዲዛይኖች ውስጥ ከፍተኛ ትኩረትን ስቧል። የእነዚህ ናኖፓርቲክሎች ሊሆኑ የሚችሉ አተገባበሮች የሴል ክፍፍልን ለማሳደግ፣ የንጥረ ነገር ቅበላን ለማሻሻል እና የፀረ-ኦክሲዳንት ኢንዛይሞችን ለማግበር በብልቃጥ ባህልን ማመቻቸትን ሊያካትቱ ይችላሉ [11]።
ናኖፓርቲክሎች በእፅዋት እድገት ላይ ጥሩ የማስተዋወቅ ውጤት ቢያሳዩም፣ በ *H. perforatum* ውስጥ የFe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች እና የተመቻቹ የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች ጥምር አተገባበር ላይ የተደረጉ ጥናቶች አሁንም እምብዛም አይደሉም። ይህንን የእውቀት ክፍተት ለመሙላት፣ ይህ ጥናት የመድኃኒት ተክሎችን ባህሪያት ለማሻሻል አዳዲስ ግንዛቤዎችን ለመስጠት በብልቃጥ ሞርፎጄኔሲስ እና በሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይት ምርት ላይ ያላቸውን የተጣመረ ተጽእኖ ገምግሟል። ስለዚህ፣ ይህ ጥናት ሁለት ዓላማዎች አሉት፡ (1) የካለስ መፈጠርን፣ የተኩስ ዳግም መወለድን እና በብልቃጥ ውስጥ ሥር መስደድን ውጤታማ በሆነ መንገድ ለማበረታታት የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች ክምችትን ማመቻቸት፤ እና (2) የFe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች በእድገት መለኪያዎች ላይ ያላቸውን ተጽእኖ መገምገም። የወደፊት እቅዶች በተላመዱበት ጊዜ (በብልቃጥ ውስጥ) የተወለዱ ተክሎችን የመትረፍ መጠን መገምገምን ያካትታሉ። የዚህ ጥናት ውጤቶች የ*H. perforatum* ማይክሮፕሮፓጋሽን ውጤታማነትን በእጅጉ እንደሚያሻሽሉ ይጠበቃል፣ በዚህም ለዚህ አስፈላጊ የመድኃኒት ተክል ዘላቂ አጠቃቀም እና ባዮቴክኖሎጂ አተገባበር አስተዋጽኦ ያደርጋሉ።
በዚህ ጥናት፣ ከሜዳ የሚበቅሉ ዓመታዊ የቅዱስ ጆን ዎርት ተክሎች (እናት ተክሎች) የቅጠል ገለባዎችን አግኝተናል። እነዚህ ገለባዎች የኢንቪትሮ ባህል ሁኔታን ለማሻሻል ጥቅም ላይ ውለዋል። ከማልማትዎ በፊት ቅጠሎቹ ለብዙ ደቂቃዎች በሚፈስ ውሃ ስር በደንብ ይታጠባሉ። ከዚያም የገለባዎቹ ገጽታዎች በ70% ኤታኖል ውስጥ ለ30 ሰከንዶች በማጥለቅ በፀረ-ተባይ ተበክለዋል፣ ከዚያም ጥቂት የTween 20 ጠብታዎችን በያዘ 1.5% ሶዲየም ሃይፖክሎራይት (NaOCl) መፍትሄ ውስጥ ለ10 ደቂቃዎች ጠልቀዋል። በመጨረሻም፣ ገለባዎቹ ወደሚቀጥለው የባህል መካከለኛ ከመዛወራቸው በፊት ሶስት ጊዜ በጸዳ የተቀዳ ውሃ ታጥበዋል።
በሚቀጥሉት አራት ሳምንታት ውስጥ የተኩስ እድሳት መለኪያዎች ተለክተዋል፣ ይህም የእድሳት መጠን፣ በእያንዳንዱ የተኩስ ቁጥር እና የተኩስ ርዝመትን ያካትታል። የተተኩሱ ቡቃያዎች ቢያንስ 2 ሴ.ሜ ርዝመት ሲደርሱ፣ ግማሽ ጥንካሬ ያለው የ MS መካከለኛ፣ 0.5 mg/L ኢንዶሌቡቲሪክ አሲድ (IBA) እና 0.3% ጓር ጋም ወደያዘ የስርወ-መገኛ መካከለኛ ተላልፈዋል። የስርወ-መገኛ ባህል ለሦስት ሳምንታት ቀጥሏል፣ በዚህ ጊዜ የስርወ-መገኛ መጠን፣ የስርወ-ቁጥር እና የስርወ-ርዝመት ተለክተዋል። እያንዳንዱ ህክምና ሶስት ጊዜ ተደግሟል፣ በአንድ ድግግሞሽ 10 የተክሎች ተከላዎች ተክለዋል፣ በአንድ ህክምና በግምት 30 የተክሎች ምርት።
የእፅዋት ቁመት የተለካው ከፋብሪካው ግርጌ እስከ ረጅሙ ቅጠል ጫፍ ባለው ገዢ በመጠቀም በሴንቲሜትር (ሴንቲሜትር) ነው። ችግኞቹን በጥንቃቄ ካስወገዱ እና የሚያድጉበትን መካከለኛ ካስወገዱ በኋላ የስር ርዝመቱ ወዲያውኑ በ ሚሊሜትር (ሚሜ) ተለክቷል። በእያንዳንዱ ተክል ላይ የዛፍ ቡቃያዎች ቁጥር በቀጥታ ተቆጥሯል። በቅጠሎቹ ላይ ያሉት ጥቁር ነጠብጣቦች ቁጥር፣ ኖዱሎች በመባል የሚታወቁት፣ በእይታ ተለክተዋል። እነዚህ ጥቁር ኖዱሎች ሃይፐርሲሲን ወይም ኦክሲዴቲቭ ነጠብጣቦችን የያዙ እጢዎች እንደሆኑ ይታመናል፣ እና የእፅዋቱን ለህክምና የሚሰጠውን ምላሽ እንደ ፊዚዮሎጂያዊ አመላካች ሆነው ያገለግላሉ። የሚያድግበትን መካከለኛ በሙሉ ካስወገዱ በኋላ፣ የችግኞቹ ትኩስ ክብደት የሚለካው ሚሊግራም (ሚ.ግ) ባለው የኤሌክትሮኒክ ሚዛን በመጠቀም ነው።
የካለስ መፈጠርን መጠን ለማስላት ዘዴው እንደሚከተለው ነው፡- ለአራት ሳምንታት የተለያዩ የእድገት ተቆጣጣሪዎችን (ኪናሴስ፣ 2,4-D እና Fe3O4) በያዘ መካከለኛ ውስጥ ኤክስፕላንቶችን ካመረቱ በኋላ፣ ካለስን የመፍጠር አቅም ያላቸው ኤክስፕላንቶች ብዛት ይቆጠራል። የካለስ መፈጠርን መጠን ለማስላት ቀመር እንደሚከተለው ነው፡
እያንዳንዱ ሕክምና ሦስት ጊዜ ተደግሟል፣ በእያንዳንዱ ድግግሞሽ ቢያንስ 10 ኤፕላንትስ ተመርምሯል።
የመልሶ ማቋቋም ፍጥነት የካልለስ ቲሹ መጠንን የሚያንፀባርቀው የካልለስ ምስረታ ደረጃ ከተጠናቀቀ በኋላ የቡቃያ ልዩነት ሂደቱን በተሳካ ሁኔታ ያጠናቀቀውን ነው። ይህ አመላካች የካልለስ ቲሹ ወደ ተለዩ ቲሹዎች የመቀየር እና ወደ አዲስ የእፅዋት አካላት የማደግ ችሎታን ያሳያል።
የስርወ-ስርወት ጥምርታ ማለት ሥር መስደድ የሚችሉ የቅርንጫፎች ብዛት ከጠቅላላው የቅርንጫፎች ብዛት ጋር ያለው ጥምርታ ነው። ይህ አመላካች የስርወ-ስርወት ደረጃ ስኬትን ያንፀባርቃል፣ ይህም በጥቃቅን ስርጭት እና በእፅዋት ስርጭት ውስጥ ወሳኝ ነው፣ ምክንያቱም ጥሩ ሥርወ-ስርወት ችግኞች በማደግ ላይ ባሉ ሁኔታዎች ውስጥ በተሻለ ሁኔታ እንዲድኑ ስለሚረዳ።
የሃይፐርሲሲን ውህዶች በ90% ሜታኖል ተወስደዋል። ሃምሳ ሚሊ ግራም የደረቀ የእፅዋት ቁሳቁስ በ1 ሚሊ ሊትር ሜታኖል ውስጥ ተጨምሮ በጨለማ ክፍል የሙቀት መጠን ለ20 ደቂቃ በአልትራሳውንድ ማጽጃ (ሞዴል A5120-3YJ) ውስጥ በ30 kHz ውስጥ ተጨምሯል። ከሶኒኬሽን በኋላ፣ ናሙናው በ6000 rpm ለ15 ደቂቃ በሴንትሪፉጅ ተለክቷል። ሱፐርናታንቱ ተሰብስቦ የሃይፐርሲሲንን የመምጠጥ አቅም በ592 nm በPlus-3000 S spectrophotometer በConceiçao et al. [14] በተገለጸው ዘዴ መሰረት ተለክቷል።
አብዛኛዎቹ የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች (PGRs) እና የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች (Fe₃O₄-NPs) ሕክምናዎች በተሃድሶ በተቀሰቀሱ ቅጠሎች ላይ ጥቁር ኖዱል እንዲፈጠር አላደረጉም። በ0.5 ወይም 1 ሚ.ግ/ሊ 2,4-D፣ 0.5 ወይም 1 ሚ.ግ/ሊ ኪኔትን፣ ወይም 1፣ 2 ወይም 4 ሚ.ግ/ሊ የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች ሕክምናዎች ውስጥ ምንም ኖዱሎች አልታዩም። ጥቂት ውህዶች እንደ 2,4-D (0.5-2 ሚ.ግ/ሊ) ከኪኔትን (1-1.5 ሚ.ግ/ሊ) እና የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች (2-4 ሚ.ግ/ሊ) ጥምረት ባሉ ከፍተኛ የኪኔትን እና/ወይም የብረት ኦክሳይድ ናኖፓርቲክሎች ክምችት ላይ የኖዱል እድገት (ነገር ግን በስታቲስቲክስ ደረጃ ጉልህ አይደለም) ትንሽ ጭማሪ አሳይተዋል። እነዚህ ውጤቶች በስእል 2 ላይ ይታያሉ። ጥቁር ኖዱሎች በተፈጥሮ የሚገኙ እና ጠቃሚ የሆኑ የሃይፐርሲሲን የበለፀጉ እጢዎችን ይወክላሉ። በዚህ ጥናት፣ ጥቁር ኖዱሎች በዋናነት ከቲሹዎች ቡናማ ቀለም ጋር የተያያዙ ነበሩ፣ ይህም ለሃይፐርሲሲን ክምችት ምቹ አካባቢን ያመለክታል። በ2,4-D፣ ኪኔቲን እና Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች የሚደረግ ሕክምና የካልስ እድገትን፣ ቡናማነትን መቀነስን እና የክሎሮፊል ይዘትን መጨመርን ያበረታታል፣ ይህም የተሻሻለ የሜታቦሊክ ተግባር እና የኦክሲዴቲቭ ጉዳትን ሊቀንሰው እንደሚችል ይጠቁማል [37]። ይህ ጥናት ኪኔቲን ከ2,4-D እና Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች ጋር በማጣመር በሴንት ጆንስ ዎርት ካለስ እድገት እና እድገት ላይ ያለውን ተጽእኖ ገምግሟል (ምስል 3a–g)። ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች ፀረ-ፈንገስ እና ፀረ-ተሕዋስያን ተግባራት እንዳላቸው አሳይተዋል [38፣ 39] እና ከእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች ጋር በጥምረት ጥቅም ላይ ሲውሉ የእፅዋትን የመከላከያ ዘዴዎችን ሊያነቃቁ እና የሴሉላር ውጥረት ኢንዴክሶችን ሊቀንሱ ይችላሉ [18]። የሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይቶች ባዮሲንተሲስ በጄኔቲክ ቁጥጥር የሚደረግበት ቢሆንም፣ ትክክለኛው ምርታቸው በአካባቢ ሁኔታዎች ላይ በእጅጉ የተመካ ነው። የሜታቦሊክ እና የሞርፎሎጂ ለውጦች የተወሰኑ የእፅዋት ጂኖችን አገላለጽ በመቆጣጠር እና ለአካባቢ ሁኔታዎች ምላሽ በመስጠት የሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይት ደረጃዎችን ሊነኩ ይችላሉ። በተጨማሪም፣ ኢንዳክተሮች አዳዲስ ጂኖችን ማግበር ሊያስከትሉ ይችላሉ፣ ይህም በተራው የኢንዛይም እንቅስቃሴን ያነቃቃል፣ በመጨረሻም በርካታ ባዮሲንተቲክ መንገዶችን ያነቃቃል እና ሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይቶች እንዲፈጠሩ ያደርጋል። በተጨማሪም፣ ሌላ ጥናት እንዳመለከተው ጥላን መቀነስ የፀሐይ ብርሃን መጋለጥን ይጨምራል፣ በዚህም በ *Hypericum perforatum* ተፈጥሯዊ መኖሪያ ውስጥ የቀን ሙቀት ይጨምራል፣ ይህም የሃይፐርሲሲን ምርት እንዲጨምር አስተዋጽኦ ያደርጋል። በእነዚህ መረጃዎች ላይ በመመስረት፣ ይህ ጥናት የብረት ናኖፓርቲክሎች በቲሹ ባህል ውስጥ እንደ እምቅ ፈጣሪዎች ሚና መርምሯል። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት እነዚህ ናኖፓርቲክሎች በሄስፔሪዲን ባዮሲንተሲስ ውስጥ የተሳተፉ ጂኖችን በኢንዛይም ማነቃቂያ አማካኝነት ማግበር ይችላሉ፣ ይህም የዚህ ውህድ ክምችት እንዲጨምር ያደርጋል (ምስል 2)። ስለዚህ፣ በተፈጥሮ ሁኔታዎች ውስጥ ከሚበቅሉ ተክሎች ጋር ሲነጻጸር፣ መካከለኛ ጭንቀት ከሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይቶች ባዮሲንተሲስ ጋር ከተሳተፉ ጂኖች ማግበር ጋር ሲጣመር በቪቮ ውስጥ ያሉ ውህዶች ማምረት ሊሻሻል እንደሚችል መከራከር ይቻላል። የጥምር ሕክምናዎች በአጠቃላይ በመልሶ ማቋቋም ፍጥነት ላይ አዎንታዊ ተጽእኖ ይኖራቸዋል፣ ነገር ግን በአንዳንድ ሁኔታዎች ይህ ውጤት ይዳከማል። በተለይም፣ በ1 ሚ.ግ/ሊትር 2,4-D፣ 1.5 ሚ.ግ/ሊትር ኪናሴ እና የተለያዩ ክምችቶች የሚደረግ ሕክምና ከቁጥጥር ቡድኑ ጋር ሲነጻጸር በተናጥል እና በከፍተኛ ሁኔታ የመልሶ ማቋቋም መጠኑን በ50.85% ሊጨምር እንደሚችል ይጠቁማሉ (ምስል 4ሐ)። እነዚህ ውጤቶች እንደሚያመለክቱት የተወሰኑ የናኖሆርሞን ውህዶች የእፅዋትን እድገት እና የሜታቦላይት ምርትን ለማሳደግ በተቀናጀ መልኩ ሊሰሩ ይችላሉ፣ ይህም ለመድኃኒት ተክሎች የቲሹ ባህል ትልቅ ጠቀሜታ አለው። ፓልመር እና ኬለር [50] 2,4-D ሕክምና በሴንት ፐርፎራተም ውስጥ የካልለስ መፈጠርን በተናጥል ሊያመጣ እንደሚችል አሳይተዋል፣ የኪናሴ መጨመር ደግሞ የካልለስ መፈጠርን እና ዳግም መወለድን በእጅጉ ያሻሽላል። ይህ ውጤት የተከሰተው የሆርሞን ሚዛን መሻሻል እና የሴል ክፍፍል ማነቃቂያ ምክንያት ነው። ባል እና ሌሎች [51] የFe₃O₄-NP ሕክምና የፀረ-ኦክሲዳንት ኢንዛይሞችን ተግባር በተናጥል ሊያሻሽል እንደሚችል ደርሰውበታል፣ በዚህም በሴንት ፐርፎራተም ውስጥ የስር እድገትን ያበረታታል። በ0.5 ሚ.ግ/ሊ፣ 1 ሚ.ግ/ሊ እና 1.5 ሚ.ግ/ሊ ክምችት ላይ Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎችን የያዙ የባህል ሚዲያዎች የተልባ ተክሎችን የመታደስ መጠን አሻሽለዋል [52]። የኪኔቲን፣ 2,4-ዲክሎሮቤንዞቲያዞሊኖን እና Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች አጠቃቀም የካልስ እና የስር መፈጠር መጠኖችን በእጅጉ አሻሽሏል፣ ሆኖም ግን፣ እነዚህን ሆርሞኖች በብልቃጥ መልሶ ማቋቋም ለመጠቀም ሊሆኑ የሚችሉ የጎንዮሽ ጉዳቶች ግምት ውስጥ መግባት አለባቸው። ለምሳሌ፣ የ2,4-ዲክሎሮቤንዞቲያዞሊኖን ወይም ኪኔቲን የረጅም ጊዜ ወይም ከፍተኛ ክምችት መጠቀም የሶማቲክ ክሎናል ልዩነት፣ ኦክሲዴቲቭ ውጥረት፣ ያልተለመደ የካልስ ሞርፎሎጂ ወይም ቪትሪፊኬሽን ሊያስከትል ይችላል። ስለዚህ፣ ከፍተኛ የመልሶ ማቋቋም ፍጥነት የጄኔቲክ መረጋጋትን የግድ አይተነብይም። ሁሉም የተወለዱ ተክሎች ከኢን ቪቮ እፅዋት ጋር ያላቸውን ተመሳሳይነት እና ተመሳሳይነት ለመወሰን ሞለኪውላዊ ማርከሮችን (ለምሳሌ RAPD፣ ISSR፣ AFLP) ወይም ሳይቶጄኔቲክ ትንተና በመጠቀም መገምገም አለባቸው።
ይህ ጥናት ለመጀመሪያ ጊዜ የእፅዋት እድገት ተቆጣጣሪዎች (2,4-D እና ኪኔቲን) ከ Fe₃O₄ ናኖፓርቲክሎች ጋር በመተባበር ጥቅም ላይ መዋላቸው ሞርፎጄኔሲስን እና ቁልፍ ባዮአክቲቭ ሜታቦላይቶችን (hypericin እና hyperosideን ጨምሮ) በ *Hypericum perforatum* ውስጥ ማከማቸትን ሊያሻሽል እንደሚችል አሳይቷል። የተመቻቸ የሕክምና ዘዴ (1 mg/L 2,4-D + 1 mg/L Kinetin + 4 mg/L Fe₃O₄-NPs) ከፍተኛ የካልስ ምስረታ፣ ኦርጋኖጄኔሲስ እና ሁለተኛ ደረጃ ሜታቦላይት ምርትን ብቻ ሳይሆን መለስተኛ የማነሳሳት ውጤት አሳይቷል፣ ይህም የእፅዋቱን የጭንቀት መቻቻል እና የመድኃኒት ዋጋን ሊያሻሽል ይችላል። የናኖቴክኖሎጂ እና የእፅዋት ቲሹ ባህል ጥምረት ለትልቅ ደረጃ የመድኃኒት ውህዶች በብልቃጥ ምርት ዘላቂ እና ቀልጣፋ መድረክ ይሰጣል። እነዚህ ውጤቶች ለኢንዱስትሪ አፕሊኬሽኖች እና ለወደፊቱ በሞለኪውላዊ ዘዴዎች፣ በመጠን ማመቻቸት እና በጄኔቲክ ትክክለኛነት ላይ ምርምርን መንገድ ይጠርጋሉ፣ በዚህም በመድኃኒት ተክሎች ላይ መሰረታዊ ምርምርን ከተግባራዊ ባዮቴክኖሎጂ ጋር ያገናኛል።